假杜鹃提取物对小鼠镇静催眠作用的实验研究(1)
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[摘要] 目的 探讨假杜鹃提取物对小鼠的镇静催眠作用。 方法 小鼠腹腔注射给药，观察小鼠延长戊巴比妥钠的睡眠时间及自主活动次数。 结果 假杜鹃提取物能显著延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间(P < 0.01)，减少小鼠自主活动次数(P < 0.05)。 结论 假杜鹃提取物对小鼠有明显的镇静催眠作用。
[关键词] 假杜鹃；镇静；催眠；首演研究
[中图分类号] R—33 [文献标识码] A [文章编号] 1674—4721(2012)09(a)—0005—03
爵床科假杜鹃属植物，在全球有230～250种。分布于东半球的热带至亚热带地区，非洲种类特多。我国有假杜鹃B.cristata L.等4种1个变种，常生于南部和西南部海拔1 000 m以下地区，以广东、广西、贵州、云南、四川分布最广[1]。文献报道假杜鹃属植物具有多种生理活性，如花叶假杜鹃地上部分的甲醇提取物具有非常显著的神经药理活性，与GAGBA受体呈现良好的剂量相关性[2]，并具有明显的抗炎活性[3]。根的提取物能明显干扰雄鼠精子生成，但对精原细胞无明显影响[4]。
植物遗传学认为，假杜鹃属植物亲缘关系相近，化学成分相近，药理作用相近[5]。由于假杜鹃属植物花叶假杜鹃(Barleria lupulina Lindl.)有神经药理作用方面的报道，且民间常用于减缓压力，因此，笔者对我国南方分布广泛的假杜鹃开展相关研究，希望能开发出新的药用资源植物。本课题将着眼于发挥天然植物药的优势，对假杜鹃的神经药理活性进行初步评估和探讨，为今后有关研究奠定实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 动物 昆明种小鼠，体重(20±2) g，雌雄各半，由山东大学实验动物中心提供。
1.1.2 仪器 YLS—1A多功能小鼠自主活动记录仪，山东省医学科学院设备供应维修站；1 mL一次性注射器，上海双鸽实业有限公司；R—201旋转蒸发仪，上海申生科技有限公司；ZK—82A电热真空干燥箱，上海实验仪器厂。
1.1.3 药品及试剂 假杜鹃于2006年12月在广州白云山脚采挖，经南方医科大学中医药学院药用植物与鉴定学教研室马骥教授鉴定为爵床科假杜鹃属植物假杜鹃(Barleria crisrara)。本实验所用为该植物地上部分，简单铡成小段后，常温下晾干，备用。乙醇购自齐鲁石化化学试剂厂，石油醚和丙二醇购自上海试剂一厂，其他试剂均为分析纯。戊巴比妥钠购自sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 假杜鹃乙醇提取物的制备 干燥植物粉碎成粗末，称取250 g用8倍(2 000 mL)、5倍(1 250 mL)、5倍(1 250 mL)乙醇分别在65℃水浴下回流3 h、2 h和2 h。抽滤合并乙醇液，45℃下减压回收乙醇，流浸膏于真空烘箱中45℃减压烘干后研粉，滤纸包裹用石油醚(30～60℃)55℃索氏回流约10 h脱脂。烘干称重得18.6 g，收率为7.44%。冰箱中冷贮，备用。
1.2.2 急性毒性实验 通过预试验摸索出假杜鹃乙醇提取物对小鼠的最大致死量为5 g/kg，在此基础上开展急性毒性实验。取体重(20±2) g小鼠24 只，随机分成3 组，从4.8 g/kg的剂量开始，组距间比设为0.958，即分别为4.4 g/kg、4.6 g/kg、4.8 g/kg给3 组小鼠于晚上20 时一次腹腔注射给药，注射容量为0.2 mL/10 g ，然后连续观察7 d，记录逐日的小鼠毒性反应及死亡数[6]。
1.2.3 对小鼠自主活动的影响实验 取体重(20±2) g小鼠27 只，随机分成3 组，分别给予0.9%氯化钠溶液(空白对照组)，提取物剂量400 mg/kg(低剂量组)、700 mg/kg(中剂量组)和1 000 mg/kg(高剂量组)，腹腔注射，注射容量为0.2 mL/20 g，30 min后放在多功能小鼠自主活动记录仪的箱格中适应3 min，分别记录5 min内小鼠的活动次数[7]。
1.2.4 延长戊巴比妥钠的睡眠时间实验 取体重(20±2) g小鼠40 只，随机分成4 组，分别给予0.9%氯化钠溶液(空白对照组)，提取物剂量400 mg/kg(低剂量组)、700 mg/kg(中剂量组)和1 000 mg/kg(高剂量组)腹腔注射，注射容量为0.2 mL/20 g，给药30 min后分别腹腔注射戊巴比妥钠70 mg/kg，观察睡眠小鼠只数，并记录小鼠的睡眠时间(以翻正反射消失为入睡时间，从翻正反射消失至恢复时间为睡眠持续时间)[7]。
1.3 数据处理
统计方法采用SPSS 10.0软件包对数据进行t检验和卡方检验分析数据，t检验结果以x±s表示。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 急性毒性实验结果 ......
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