新生儿人巨细胞病毒感染的实验室诊断研究进展(2)
4.2 荧光定量PCR检测
荧光定量PCR扩增反应原理与普通PCR方法相似,在PCR过程中通过荧光信号实时检测产物量,能检测病毒载量绝对值,该方法同定性PCR方法相比具有重复性好且敏感性强的特点。有文献报道[12-13]其敏感性明显优于定性PCR和抗原血症的检测方法。同时,荧光定量PCR法能更早检测到病毒,甚至比临床症状出现的时间提前3~10 d[14],这表明其在早期诊断、预测疗效中有着重要的价值。
4.3 DNA芯片技术
DNA芯片技术是利用现代基因工程技术与微电子技术相结合,利用杂交测序方法,通过将知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法快速地检出目的基因的一种高科技手段。通过芯片技术对HCMV-DNA检测使得整个分析过程可做到连续化、微型化、集成化、全自动化,使得分析速度有极大提高。
综上所述,新生儿先天性HCMV感染主要表现为非特异性的临床体征,依据中华医学会儿科学分会感染消化学组制定的《巨细胞病毒感染诊断方案》,必须有五项实验室检查之一阳性才可诊断[15],故对HCMV活动性感染实验检测有着更重要的诊断作用。相信随着分子生物学技术的不断发展,更加快速、准确、方便的检测方法将逐步应用于新生儿HCMV活动性感染的临床检测中。
, http://www.100md.com
[参考文献]
[1] 张书红. 人巨细胞病毒感染检测方法的研究进展[J]. 医学综述,2009,15(22):3495-3497.
[2] 刘利荣. 巨细胞病毒感染婴儿的随访观察[J]. 吉林医学,2012,33(1):178-179.
[3] 金艳,邓松华,王明丽. 人巨细胞病毒先天性感染实验室诊断的研究进展[J]. 安徽医科大学学报,2011,46(3):282-285.
[4] 白剑,肖漓,石炳毅. 器官移植术后人巨细胞病毒感染的实验室诊断研究进展[J]. 中国误诊学杂志,2008,8(12):2791-2793.
[5] 方峰. 新生儿巨细胞病毒感染及疾病的诊治[J]. 中国实用儿科杂志,2011,26(1):6-8.
, 百拇医药
[6] Novak Z,Ross SA,Patro RK,et a1. Enzyme-linked immunosorbent assay method for detection of cytomegalovirus strain-specific antibody responses[J]. Clin Vaccine Immunol,2009,16(2):288-290.
[7] 燕航,薛武军,田普训. 肾移植患者巨细胞病毒感染检测方法的比较[J]. 肾脏病与透析肾移植杂志,2002,11(2):120-123.
[8] Revello MG,Gerna G. Diagnosis and management of human cytomegalovirus infection in the mother,fetus, and newborn infant[J]. Clin Microbiol Rev,2002,15(4):680-715.
, http://www.100md.com
[9] 郭兰英,宋琳,刘琳. 金标免疫层析法鉴定人巨细胞病毒IgM抗体方法[J]. 洛阳医学院学报,2000,18(3):199-200.
[10] Verschuuren EA,Harmsen Me,Limburg PC,et al. Towards standardization of the human cytomegalovirus antigenemia assay[J]. Intervirology,1999,42(5-6):382-389.
[11] Distéfano AL,Alonso A,Martin F,et al. Human cytomegalovirus:detection of congenital and perinatal infection in Argentina[J]. BMC Pediatrics,2004,12(4):11-19.
, 百拇医药 [12] Piiparinen H,Hockerstedt K,Gronhagen-Riska C,et al. Comparison of two quantitative CMV PCR tests,Cobas Amplicor CMV Monitor and TaqMan assay,and pp65-antigenemia assay in the determination of viral loads from peripheral blood of organ transplants patients[J]. Clin Vitol,2004,30(3):258-266.
[13] Choi SM,Lee DG,Lim J,et al. Comparison of quantitative eytomegalovirus real-time PCR in whole blood and pp65 antigenemia assay:clinical utility of CMV real time PCR in hematopoietic stem cell transplant recipients[J].J Korean Med Sci,2009,24(4):571-578.
[14] 唐娟,李东明. 尿巨细胞病毒定量检测在婴儿巨细胞病毒感染诊治中的意义[J]. 现代中西医结合杂志,2010,19(7):869-870.
[15] 中华医学会儿科学分会感染消化学组. 巨细胞病毒感染诊断方案[J]. 中华儿科杂志,1999,37(3):441.
(收稿日期:2012-06-13 本文编辑:陈 俊), http://www.100md.com(王帅)
荧光定量PCR扩增反应原理与普通PCR方法相似,在PCR过程中通过荧光信号实时检测产物量,能检测病毒载量绝对值,该方法同定性PCR方法相比具有重复性好且敏感性强的特点。有文献报道[12-13]其敏感性明显优于定性PCR和抗原血症的检测方法。同时,荧光定量PCR法能更早检测到病毒,甚至比临床症状出现的时间提前3~10 d[14],这表明其在早期诊断、预测疗效中有着重要的价值。
4.3 DNA芯片技术
DNA芯片技术是利用现代基因工程技术与微电子技术相结合,利用杂交测序方法,通过将知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法快速地检出目的基因的一种高科技手段。通过芯片技术对HCMV-DNA检测使得整个分析过程可做到连续化、微型化、集成化、全自动化,使得分析速度有极大提高。
综上所述,新生儿先天性HCMV感染主要表现为非特异性的临床体征,依据中华医学会儿科学分会感染消化学组制定的《巨细胞病毒感染诊断方案》,必须有五项实验室检查之一阳性才可诊断[15],故对HCMV活动性感染实验检测有着更重要的诊断作用。相信随着分子生物学技术的不断发展,更加快速、准确、方便的检测方法将逐步应用于新生儿HCMV活动性感染的临床检测中。
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[13] Choi SM,Lee DG,Lim J,et al. Comparison of quantitative eytomegalovirus real-time PCR in whole blood and pp65 antigenemia assay:clinical utility of CMV real time PCR in hematopoietic stem cell transplant recipients[J].J Korean Med Sci,2009,24(4):571-578.
[14] 唐娟,李东明. 尿巨细胞病毒定量检测在婴儿巨细胞病毒感染诊治中的意义[J]. 现代中西医结合杂志,2010,19(7):869-870.
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(收稿日期:2012-06-13 本文编辑:陈 俊), http://www.100md.com(王帅)