赵 琳陈 瑞龙鼎新陈 锋▲陈春英

    1.南华大学公共卫生学院，湖南衡阳421001；2.国家纳米科学中心中国科学院纳米生物效应与安全性重点实验室，北京100190

    低剂量纳米银暴露致小鼠巨噬细胞RAW264.7的应激反应

    赵 琳1，2陈 瑞2龙鼎新1陈 锋1▲陈春英2

    1.南华大学公共卫生学院，湖南衡阳421001；2.国家纳米科学中心中国科学院纳米生物效应与安全性重点实验室，北京100190

    目的探讨纳米银(AgNPs)对小鼠巨噬细胞RAW264.7毒性效应的影响，为AgNPs生物安全性的研究提供依据。方法将不同浓度的AgNPs(0、6.25、12.5、25、50、60、80 μg/ml)和RAW264.7共同培养，8、24 h后采用甲基噻唑基四唑比色法(MTT)测定各组细胞的活力，选取2.5、5 μg/ml两个无明显细胞毒性的浓度进行后续研究，检测应激相关基因和蛋白表达的变化；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中炎症因子TNF-α和IL-6的表达。结果用2.5、5 μg/ml的AgNPs处理细胞，24 h后相差显微镜下可见AgNPs进入细胞内，且5 μg/ml组的细胞形态有明显改变；8、24 h后ELISA结果显示，IL-6无明显变化，在5 μg/ml的24 h处理组TNF-α表达有显著升高，内质网应激相关的基因和蛋白在5 μg/ml的24 h处理组表达明显上调。结论RAW264.7细胞暴露于低剂量的AgNPs后表现出明显的应激反应，并且与暴露剂量和作用时间呈正相关。低剂量AgNPs能够干扰细胞的正常生理功能，长期暴露可能产生不可逆的损伤，应引起高度关注。

    纳米银；低剂量；毒性；内质网应激

    随着对纳米技术领域的研究与日俱增，纳米材料被广泛应用于几乎所有的领域，目前市场上的应用已超过1000种纳米相关产品[1]。由于纳米银颗粒(AgNPs)具有良好的抗菌性能，在抗菌敷料、涂料、化妆品和医疗设备等方面应用十分广泛，AgNPs相关产品在应用中通过与人体密切接触或环境释放，均可经呼吸道、皮肤或

    消化道等途径进入血液循环对人体健康产生危害[2]。巨噬细胞是机体免疫的一道重要防线，它具有吞噬、清除异物和保护功能，因此，研究AgNPs对巨噬细胞的影响，对评价纳米物质的毒性具有十分重要的意义。

    研究发现，AgNPs毒性呈剂量依赖性[3-5]，Tiwari等[6]研究AgNPs对大鼠毒性影响的结果发现，在40 mg/kg组表现出明显遗传毒性，并认为AgNPs剂量<10 mg/kg是安全的 ......