人RAG2基因5′近端染色质结构定量差异分析及可接近区域转录调控机制研究(2)
本研究将通过CHART-PCR(chromatin accessibility by real-time PCR)方法对人RAG2基因5′近端区域的DNase Ⅰ 超敏位点(DNase Ⅰ hypersensitivity site,DHS)进行定量分析,比较RAG阳性(RAG+)T和B淋巴细胞、RAG阴性(RAG-)淋巴细胞以及非淋巴细胞的染色质开放状态变化;研究T细胞中转录因子(transcription factor,TF)与DHS在体外(in vitro)和在体(in vivo)的特异性结合對报告基因的调控作用以及TF显性负突变体(dominant-negative mutant,DNM)对内源性RAG2表达的直接影响。
1材料与方法
1.1细胞
Reh(RAG+人pre-B细胞)由ATCC提供 ......
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1.1细胞
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