1資料与方法

    1.1临床资料和试剂

    乳腺癌及正常乳腺组织标本来源于沈阳医学院附属中心医院，KDM3A鼠抗人单克隆抗体购自美国Abcam公司，SP免疫组化试剂盒和DAB显色液均购自北京中杉金桥生物技术公司。

    1.2检测方法

    免疫组化染色采用SP法，置65℃恒温烤箱烘烤4 h后，石蜡切片经脱蜡，抗原修复，血清封闭，加鼠抗人KDM3A(滴度1︰500)置4℃孵育过夜，室温复温后反复磷酸盐缓冲液(PBS)清洗；加生物素标记的二抗，室温10 min，PBS冲洗，用辣根过氧化物酶标记的链霉素亲和素复合物孵育，PBS冲洗，DAB染色，苏木精复染，脱水，透明，封片。实验中应用已知阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。

    1.3结果判定

    KDM3A染色以细胞核出现黄色或棕色颗粒为阳性。无阳性细胞为0分，阳性细胞1%～25%为1分，>25%～50%为2分，>50%～75%为3分，>75%为4分。细胞无色为0分 ......