朱海燕 吴雄健 曾 斌 谢志军

    赣南医学院第一附属医院消化内科，江西赣州 341000

    肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)的活化是慢性肝病进展的中心环节[1-2]，人及大鼠的HSC都可表达低亲和力受体(p75 neurotrophin receptor，p75NTR)，当神经生长因子(nerve growth factor，NGF)与p75NTR结合时可诱导细胞凋亡[3]。本研究主要探讨NGF及p75NTR影响HSC增殖及凋亡的可能作用机制，寻找防治肝纤维化的新途径。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    NGF及p75NTR购自美国RD公司；AnnexinⅤ-FITC购自美国罗氏公司；P53 and Caspase-3抗体购自武汉博士德公司；S-P超敏试剂盒(鼠/兔)及DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司；DMEM培养液及胎牛血清购至美国Gibco公司。HSC系HSC-T6由上海中医药大学徐列明教授提供，系SV40转染后的大鼠HSC，具有活化HSC表型。

    1.2 方法

    1.2.1 HSC-T6的培养与传代 使用DMEM培养液(含100 U/ml青霉素，100 U/ml链霉素，10%胎牛血清)进行培养。设定培养温度37℃，CO2浓度5%，湿度饱和。于隔天进行一次换液。待细胞密度达80%～90%，以0.02%EDTA和0.25%胰蛋白酶分散细胞 ......