廖 伟 蔡崇明 王海彬 程 伟 曾照彬 杨少春

    赣南医学院第一附属医院神经外科，江西赣州 341000

    脑缺血疾病是一种可导致神经元不可逆性损伤、坏死的脑血管疾病，严重威胁人类健康。现有的溶栓、神经营养治疗等方式对于脑缺血损伤的治疗效果有限。据统计，高达75%的脑缺血损伤患者存有不同程度的神经功能障碍，如何修复脑缺血损伤后导致的神经功能障碍成为目前治疗的难点[1]。目前在临床上，内源性神经干细胞是脑缺血损伤治疗的一个突破点，提高内源性神经干细胞的数量能够治疗脑缺血损伤[2]。有研究证实[3-4]，miR-34a 能通过沉默信息调节因子1(Sirt1)调控外源性神经干细胞增殖。但其是否参与调控脑缺血损伤后内源性神经干细胞的增殖，目前国内外尚未见相关报道。为此，本研究通过观察大鼠脑缺血损伤后miR-34a 及其靶基因Sirt1、核因子E2 相关因子2(NRF2)等的表达情况，并利用激活Sirt1 的表达，观察其上游miR-34a 及下游NRF2 的表达变化，进一步探讨miR-34a-Sirt1-NRF2 通路调控脑缺血损伤后内源性神经干细胞增殖过程，以进一步揭示脑缺血损伤后内源性神经干细胞的信号调控机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    选择50只健康成年雄性SD大鼠(购自赣南医学院实验动物中心，合格证号：021-96-02)，体重200～300 g，8 周龄。饲养环境：自由喂养，不限制饮食，室温(20±2)℃，湿度(60±10)%，光照时间12 h(8∶00～20∶00)。本研究经相关实验动物伦理委员会审核通过。

    1.2 主要仪器及试剂

    FL40S.BLB Toshiba 荧光显微镜(日本东芝机械株式会社)、ABI 7900HT Fast 实时荧光定量PCR系统(美国应用生物系统ABI公司)、Chemilmager5500 自动电泳凝胶成像分析系统(美国AlphaInnotech公司)、Ts2-FL 倒置显微镜(日本尼康株式会社)、FACSCalibur流式细胞仪(美国BD公司)、3-30K 台式低温超速离心机(德国希格玛Sigma 实验室离心机公司)；白藜芦醇试剂(上海梯希爱化成工业发展有限公司、生产批号501-36-0) ......