胡春兰 陈媛媛 王春民 任贵奇▲

    1.颈复康药业集团有限公司，河北承德 067000；2.河北省中药新辅料技术创新中心，河北承德 067000

    鹿血系鹿科动物梅花鹿(Cervus nippon)和马鹿(Cervus elaphus)的血液，具有养血益精、行血祛瘀、消肿等功效。因其资源稀缺，所以“以次充好、假冒伪劣”等现象时有发生[1-5]。睾丸酮作为鹿血中的有效成分之一，具有维持肌肉强度及质量、维持骨质密度及强度、提神及提升体能等作用。通过测定鹿血中的睾丸酮含量，能在一定程度上评价鹿血的品质[6]。由于鹿血中甾体类化合物的研究比较少，作为甾体类化合物的睾丸酮分离、结构鉴定仅限于使用高效液相色谱(high performance liquid chromatography，HPLC)[7-8]。但是HPLC测灵敏度低，抗干扰能力差，易出现假阳性。液相色谱-质谱联用法具有定性能力强，检测限低等优点[9-12]，其能够利用四级杆检测器克服基质干扰，有更好的分辨率、更高的灵敏度、具有很强的定性定量能力[13-14]。有效的样品前处理对于定性定量分析的准确性至关重要，固相萃取作为前处理方法，具有便捷、高效等优点[15-16]。本实验采用两步提取、两步萃取的方法提取和净化鹿血中的睾丸酮，旨在建立液相色谱-质谱联用法测定睾丸酮的含量的方法。

    1 仪器与试药

    1.1 仪器

    Triple-TOF 4600 液质联用质谱仪(AB SCIEX)；Centrifuge 5424 离心机(Eppendorf)；12 孔固相萃取仪(CNW Technologies GmbH)；RE-5286A 旋转蒸发仪(上海雅荣生化设备仪器有限公司)；KQ-300DE 型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；涡旋仪(IKA)；0.22 μm 微孔滤膜(Sartorius Stedim Biotech GmbH)。

    1.2 材料

    鹿血(批号：B1501、B1502、B1503、B1504 ......