陈 洁 谢叶文 潘 洁 丁 骏

    江苏省常州市第二人民医院中心实验室，江苏常州 213000

    树突状细胞相关性C型凝集素-1(dendritic cellassociated C-type lectin-1，Dectin-1)是属于ⅡC 型凝集素受体 (C-type lectin receptors，CLR) 家族成员之一，由CLEC7a基因编辑。主要表达于巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细胞等多种细胞表面[1]，同时在肺、胸腺等多个器官中也高表达，其主要作用是模式识别受体，Dectin-1可通过识别CD4+、CD8+T细胞表面的内源性受体，从而促进T细胞的增值[2]，Dectin-1在免疫预防与免疫监视中均起到重要的作用。

    树突状细胞(dendritic cell，DC)是机体功能最强的抗原递呈细胞(antigen-presenting Cell，APC)，现已被应用到多种肿瘤治疗中[3]。Dectin-1是最早发现在DC 上的模型识别受体，Dectin-1 可以识别 β-(1，3)-葡聚糖与其结合刺激树突状细胞诱导Th1和Th17细胞分化[4-5]，启动机体的获得性免疫，同时也能通过识别真菌细胞壁上的β-葡聚糖，驱动宿主细胞对真菌吞噬和黏附，并以这种方式开启机体的天然免疫。这明确了Dectin-1在肿瘤免疫中的机制，同时也是把Dectin-1作为肿瘤免疫治疗的新靶点的依据。

    CRISPR-Cas9是古细菌和细菌在演化过程中产生的一种适应性免疫防御[6]，其作用是抵御外界侵入细菌的DNA或外源DNA，CRISPR-Cas9基因编辑系统是基因敲入技术中最高效的一种方法，其能够准确识别外来的DNA，并将其双链进行特异性切割，应用CRISPR-Cas9系统，通过设计靶向目的基因的sgRNA实现Cas9蛋白对DNA双链的特异性切割。哺乳动物中，DNA双链断裂后会发生非同源末端连接介导的非同源末端连接修复，DNA双链在重新连接的同时引入随机的碱基缺失或增加，造成基因序列移码突变，蛋白功能缺失(图1，封三)[7-9]。本研究通过CRISPRCas9技术敲除小鼠体内Dectin-1基因，进一步研究Dectin-1对β-葡聚糖抗肿瘤的影响，为Dectin-1在肿瘤免疫中的作用机制研究提供实验基础。 ......