王晨亮 张 菁 刘浩茹 李观华

    江西省九江市第一人民医院病理科，江西九江 332000

    肺腺癌(lung adenocarcinoma，LUAD)是非小细胞肺癌的主要亚型之一，是恶性程度最高的癌症之一，通常在晚期被诊断出，临床预后较差，5年生存率低。研究发现，糖酵解与非小细胞肺癌的增殖和转移密切相关，并受到Kirsten 大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(Kirsten rats arcoma viral oncogene homolog，KRAS)的调控，KRAS 是引发肺癌的关键基因之一，近年来针对KRAS 为分子治疗靶点的研究越来越多。乌骨藤总苷是乌骨藤辅助抗癌的主要成分，对胃癌、肉瘤、白血病、肝癌等肿瘤具有抑制作用。有研究发现，复方乌骨藤胶囊对Lewis 肺癌小鼠具有抑瘤作用, 并能够增强其肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和自然杀伤(natural killer，NK)细胞活性，从而提高荷瘤小鼠的免疫功能。目前关于乌骨藤总苷的研究还较少，乌骨藤总苷的一些作用机制也尚不明确，本研究主要就乌骨藤总苷对肺癌细胞的影响及机制进行研究，为乌骨藤总苷的进一步开发应用奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 细胞株

    人非小细胞肺癌细胞NCI-H1299 购自ATCC。将H1299 细胞置于37℃、5% CO的培养箱中，使用含有10%胎牛血清和1%青/链霉素的RMPI-1640 培养液培养。及时更换培养液，当细胞融合度达到80%～90%时用胰酶消化后进行传代。

    1.2 仪器与试剂

    乌骨藤总苷(自制，C21 甾体苷类成分含量>80%)；MTT 噻唑蓝(北京索莱宝科技有限公司，批号：303HO510)；二甲基亚砜(上海钰博生物科技有限公司，货号：YB60313ES60)；RPMI 1640 培养基[爱必信(上海)生物科技有限公司，货号：abs9468]；葡萄糖定量试剂盒(美国AAT Bioquest 公司，货号：AAT-40004)；胎牛血清[爱必信(上海)生物科技有限公司，批号：190A19]；Trizol(上海研卉生物科技有限公司，批号：50175111)；磷酸缓冲盐溶液(上海梵态生物科技有限公司 ......