梁结斐 陈震尧 吴伟斌

    1.肇庆医学高等专科学校药学院，广东肇庆 526020；2.广东省肇庆市中医院药剂科，广东肇庆 526020；3.肇庆医学高等专科学校基础医学院，广东肇庆 526020

    《中国2 型糖尿病防治指南(2020 年版)》数据显示，我国18 岁及以上人群糖尿病患病率为11.2%[1]。国内研究表明，胰岛β 细胞功能减退是我国居民2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)遗传易感性的主要因素[2]，而高血糖[3]及高血脂[4]是诱发胰岛β 细胞功能减退的常见原因。上述两种因素损伤胰岛β 细胞的机制与诱发氧化应激[5]、内质网应激[6]、线粒体功能障碍[7]及自噬[8]有关，加上与胰岛β 细胞自身的低抗氧化应激能力[9]的共同作用下，机体逐渐发展为糖尿病。四氧嘧啶(alloxan，ALX)是一种常见的用于制备糖尿病在体动物或离体细胞模型的细胞毒性试剂，可通过升高细胞内活性氧及诱发胰腺炎症等方式诱导胰岛β 细胞凋亡或坏死[10-11]。番石榴叶(Psidium guajava leaves，PGL)是桃金娘科植物番石榴的叶，是两广及福建地区的一种常见茶饮原料，其提取物具有镇痛[12]、抗氧化[13]、抗肿瘤[14]及护肝[15]等多种药理作用。在抗糖尿病方面，PGL 提取物已被证明可通过抑制NF-κB 通路及激活AMPK 通路等机制对糖尿病大鼠的心肌[16]、骨骼肌及肝细胞[17]实现保护作用。但PGL提取物能否对胰腺β 细胞具有保护作用及其可能机制尚未清楚。本研究利用ALX 诱导INS-1 细胞构建氧化应激模型，旨在探讨PGL 水提物对INS-1 细胞的保护作用及其可能的机制，为进一步开发利用PGL水提物提供前期基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料与仪器

    研究对象为大鼠胰岛细胞瘤细胞株INS-1，购自中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心。

    PGL 水提物干粉(江西沐恩堂生物科技有限公司，批号：200517)；RPMI 1640(美国Hyclone 公司，货号：8121303)；胎牛血清(浙江天杭生物科技股份有限公司，货号：13011-8611)；2-巯基乙醇、ALX、TBST即用干粉(上海麦克林生化科技有限公司，货号：M6230、A800714、T854550)；CCK-8(上海MedChemExpress 公司，货号：HY-K0301)；发光法细胞活力检测试剂盒、抗荧光淬灭封片液(含Hoechst 33342)、Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒、活性氧检测试剂盒、Rhodamine 123(RHD 123)、BCA 蛋白浓度测定试剂盒、细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒、裂解液、封闭液、ECL 化学发光试剂盒(上海碧云天生物科技有限公司 ......