rRNA扩增直接检测艾滋和结核共感染的结核分枝杆菌的初步研究
参见附件。
作者单位：650041 昆明市第三人民医院
通讯作者：汪亚玲
【摘要】 目的 建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法。方法 应用间接转录扩增技术，以结核分枝杆菌特异性rRNA为扩增目标，扩增片段被特异性DNA探针结合(杂交)，再经杂交保护分析法筛选，最后以化学发光仪检测被标记的rRNA。用该法检测62例临床标本。结果 62 例艾滋合并结核患者痰标本检出阳性9例。结论 rRNA扩增直接检测结核分枝杆菌方法作为结核病诊断的一项新的分子生物学检测方法，具有重要的临床应用价值。
【关键词】 结核分枝杆菌； rRNA
近年来，结核病已经成为艾滋病患者主要机会性感染，HIV 和结核分枝杆菌(MTB)双重感染年递增率为10%，其发生结核病的概率HIV 阴性者比MTB阳性者高30倍[1]。合并感染后，病情进展迅速，是致死的主要原因。全球每年有400万人死于HIV和结核的双重感染，艾滋病合并结核的流行较为严重。但由于艾滋病患者合并结核感染固有的特点，给诊断及治疗带来很大困难。为满足临床迫切需要一种更快、更准确地早期诊断结核病的方法，以保证及早、更合理地进行治疗，本研究引进了美国Gen-Probe公司rRNA扩增结核分枝杆菌直接检测(MTD)技术[2]，首次在国内应用于HIV/AIDS合并结核分枝杆菌感染患者中结核杆菌的检测，并与传统的涂片抗酸染色和TB-PCR法、BACTEC MGIT960培养法进行平行观察，以比较其优劣，探讨该法的临床应用价值。
1 材料和方法
1.1 样本来源及分组 本研究分析的均为临床确诊病例。主要选择2009年5月～2010年6月本院感染科住院的62例艾滋病患者的痰标本，男47例，女15例；年龄11～73岁，平均41岁，HIV感染诊断标准参照2005年我国卫生部发布的《艾滋病诊疗指南》诊断标准。
1.2 主要仪器及试剂 水浴超声仪、95 ℃干浴仪、42 ℃干浴仪、60 ℃干浴仪及LEADER 50 化学发光检测仪等均为美国Gen-Probe公司商品。MTD试剂盒、检测试剂和阳、阴性质控物等均为美国Gen-Probe公司商品 ......
作者单位：650041 昆明市第三人民医院
通讯作者：汪亚玲
【摘要】 目的 建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法。方法 应用间接转录扩增技术，以结核分枝杆菌特异性rRNA为扩增目标，扩增片段被特异性DNA探针结合(杂交)，再经杂交保护分析法筛选，最后以化学发光仪检测被标记的rRNA。用该法检测62例临床标本。结果 62 例艾滋合并结核患者痰标本检出阳性9例。结论 rRNA扩增直接检测结核分枝杆菌方法作为结核病诊断的一项新的分子生物学检测方法，具有重要的临床应用价值。
【关键词】 结核分枝杆菌； rRNA
近年来，结核病已经成为艾滋病患者主要机会性感染，HIV 和结核分枝杆菌(MTB)双重感染年递增率为10%，其发生结核病的概率HIV 阴性者比MTB阳性者高30倍[1]。合并感染后，病情进展迅速，是致死的主要原因。全球每年有400万人死于HIV和结核的双重感染，艾滋病合并结核的流行较为严重。但由于艾滋病患者合并结核感染固有的特点，给诊断及治疗带来很大困难。为满足临床迫切需要一种更快、更准确地早期诊断结核病的方法，以保证及早、更合理地进行治疗，本研究引进了美国Gen-Probe公司rRNA扩增结核分枝杆菌直接检测(MTD)技术[2]，首次在国内应用于HIV/AIDS合并结核分枝杆菌感染患者中结核杆菌的检测，并与传统的涂片抗酸染色和TB-PCR法、BACTEC MGIT960培养法进行平行观察，以比较其优劣，探讨该法的临床应用价值。
1 材料和方法
1.1 样本来源及分组 本研究分析的均为临床确诊病例。主要选择2009年5月～2010年6月本院感染科住院的62例艾滋病患者的痰标本，男47例，女15例；年龄11～73岁，平均41岁，HIV感染诊断标准参照2005年我国卫生部发布的《艾滋病诊疗指南》诊断标准。
1.2 主要仪器及试剂 水浴超声仪、95 ℃干浴仪、42 ℃干浴仪、60 ℃干浴仪及LEADER 50 化学发光检测仪等均为美国Gen-Probe公司商品。MTD试剂盒、检测试剂和阳、阴性质控物等均为美国Gen-Probe公司商品 ......
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