TGF-α在结肠癌组织的表达及临床意义(2)
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1.3 实验方法 免疫组织化学染色：石蜡切片脱蜡。蒸馏水冲洗，PBS浸泡，高压热修复抗原；切片脱蜡入水，蒸馏水冲洗；滴加兔抗人EGFR单克隆抗体、 鼠抗人转化生长因子α单克隆抗体(TGF-α)，PBS冲洗；滴加PV-9000通用型二步检测试剂1(polymer helper)，室温孵育，PBS冲洗；滴加试剂2(poly perocidase-anti-mouse/rabbit IgG)，室温孵育， PBS冲洗DAB显色；自来水冲洗，苏木素复染，脱水透明，中性树胶封片。对照设计：免疫组织化学实验同时需要设立阴性对照，以PBS代替一抗进行免疫组织化学染色，余步骤同前，以已知的阳性切片做阳性对照。染色结果的判定以细胞内(胞浆或胞核)含有棕黄色染色颗粒为阳性染色细胞。
1.4 统计学处理 应用SPSS 11.0统计软件包进行分析,计数资料比较采用卡方检验。检验水准为α=0.01。
2 结果
Olmpus病理图像采集系统采集图片，同机病理图像分析系统分析。综合结果进行判断： TGF-α主要表达于胞浆。染色阳性以细胞膜和(或)细胞浆呈棕色颗粒状染色为标准，且着色明显高于背景或背景不着色而细胞着色者为阳性细胞染色。
2.1 TGF-α在结肠炎黏膜、结肠癌组织中的表达 结肠炎中TGF-α无表达，结肠癌中阳性表达率为71.6%，结肠癌组织中阳性表达率明显高于结肠炎。
2.2 TGF-α在结肠癌中的表达与其生物学行为之间的关系 TGF-α在结肠癌中的表达与患者年龄、性别、病变部位、浸润深度、淋巴结转移及分化程度无关，而与临床分期密切相关，TNM分期Ⅰ+Ⅱ期的阳性率为48.7%,Ⅲ+Ⅳ期的阳性率为85.7%,差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。
3 讨论
TGF-α是细胞因子家族中发现较早的一类生长因子，于20世纪70 年代末，首先从几种实体肿瘤细胞介质中得到分离，并鉴定为一种多肽类生长因子。TGF-α的生物功能广泛而复杂，取决于其传递方式及靶细胞的生理状态。除在早期的胚胎发育中存在外，正常组织产生的TGF-α量很少，多种肿瘤细胞系可产生TGF-α，在对卵巢癌、结肠癌、子宫内膜癌、胃癌等的研究中均发现TGF-α表达时与肿瘤不良预后及短生存率有关 ......
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