HPLC法测定中药钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的含量(2)
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3 讨论
3.1 色谱条件的选择 张荣等[5]在对钩藤的研究报道中,采用甲醇:水(含0.01mmol/L三乙胺,冰醋酸调pH7.0)=70:30
作为流动相,钩藤碱与异钩藤碱可以达到良好的分离效果,且色谱峰峰形较好。在本研究过程中,上述色谱条件下杂质峰较多,分离效果较差,因此将流动相调整为甲醇:水(含10 mmol/L三乙胺,冰醋酸调节pH 7.4~7.6)=55:45,色谱峰较好,杂质峰少。
3.2 药材提取方法的选择 文献中记载,中药钩藤在煎煮过程中钩藤碱、异钩藤碱成分预热不稳定,因此采用了超声提取,选择50%、60%、80%浓度的乙醇作为溶剂分别进行提取,乙醇浓度80%时,成分的提取率较高,文中选择80%乙醇作为提取剂[6]。
3.3 实验相关问题 对照品钩藤碱溶液与异钩藤碱比较,稳定性稍差,因此,实验过程中对于配制的溶液均放置于-20 ℃的冷冻层进行保存[7]。反复对其稳定性进行测定,在24 h内钩藤碱与异钩藤碱的稳定性较好,因此以钩藤碱、异钩藤碱含量评价钩藤药材质量可行[8]。
总之,高效液相色谱法测定中药钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的含量,方法简单、快速、灵敏度高,稳定性好,对于评价钩藤药材质量有重要的参考依据。
参考文献
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[4]千英峰,魏璐雪,千保中.高效液相色谱法测定钩藤中钩藤碱含量[J].药物分析杂志,2006,19(1):56.
[5]张荣,刘睿,刘启德,等.钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定[J].中药新药与临床药理,2009,20(4):338-341.
[6]蒋艳芳,徐慧.超高效液相色谱法测定钩藤中的钩藤碱和异钩藤碱的含量[J].中华中医药杂志,2011,26(9):2119-2120.
[7]李雅臣,马雪梅,陈鸿英,等.钩藤总生物碱提取溶剂的选择探讨[J].天津中医药,2003,20(4):67.
[8]王晓颖,刘永静,陈丹,等.HPLC法测定不同产地钩藤中钩藤碱的含量分析[J].中国中医药科技,2011,18(3):215-216.
(收稿日期:2013-10-29) (本文编辑:黄新珍)
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