崔立然 李洪军 王宏艳 刘颖 徐浩 胡灵佳 许惠玉

    碳水化合物中的糖类化合物是自然界存在较多并具有重要生物功能的一类化合物。中药多糖特别是补益类中药多糖一般都有增强机体免疫功能的作用，能激活T细胞向Th1和Th1型方向分化、促进B细胞分泌抗体、激活巨噬细胞(MФ)的吞噬能力、自然杀伤细胞(NK)、细胞毒T细胞(CTL)对肿瘤细胞的杀伤作用、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)等免疫细胞的功能，还能活化补体，促进免疫细胞因子的生成。中药多糖在多方面对免疫系统发挥重要的调节作用，对正常细胞没有毒副作用，而其多聚体多糖结构能克服铝佐剂所形成的慢性免疫激活诱导毒性的可能性，很有希望开发成为新型疫苗佐剂[1]。姬松茸(Agaricus Blazei Murrill，ABM)原产于巴西，又称巴西蘑菇，属于担子菌亚门、层菌纲 、伞菌目、伞菌科、伞菌属。该菌不仅味道鲜美，营养丰富，而且含有丰富的蛋白质、多糖、核酸、醇类等活性成分及人体必需的多种氨基酸等成分[2]；尤其在增加机体免疫力、抗肿瘤防癌、降血脂、改善动脉硬化、防治糖尿病和增强人体免疫力等功效方面效果奇特[3-6]。课题组从姬松茸提取多糖(ABP-AW1)，探讨ABP-AW1促进OVA抗原诱导Th1/Th2免疫反应的研究，旨在寻找具有不同于铝的Th1优势反应的佐剂。

    1 材料与方法

    1.1 药物及试剂 姬松茸多糖ABP-AW1由本实验室提取分离鉴定。最终确定其为组分均一的低分子量(50 KDa)多糖；HRP标记的山羊抗鼠IgG2b，IgG1抗体(SBA公司)；HRP标记羊抗小鼠IgG抗体(中杉金桥生物技术公司)。

    1.2 动物免疫 ICR小鼠按随机数字表法分为六组，每组15只。分别为PBS免疫组、OVA免疫组(OVA 100μg/只 )、Alum 免 疫 组(OVA 100μg/只 +Alum 200μg/只)、DT1剂量免疫组(ABP-AW1 200μg/只+OVA 100μg/只)、DT2剂量免疫组(ABP-AW1 100μg/只+OVA 100μg/只)、DT3剂量免疫组(ABPAW1 50μg/只+OVA 100μg/只)。各组分别于第1天和第15天背部皮下两点注射免疫小鼠，二免后14 d取抗凝血，分离血清，-20 ℃保存备用。取脾进行病理学观察。

    1.3 免疫小鼠血清中抗OVA特异性抗体强度的测定

    1.3.1 抗血清的收集 二次免疫后14 d摘除眼球采集各组小鼠血液 ......