时梅林 白津 梅鹏金 郑骏年

    脑肿瘤中胶质瘤发病率最高，在国内约占原发性颅内肿瘤的40%~50%，由于肿瘤呈浸润性生长，手术、化疗及放疗效果均不理想，5年生存率不到3%[1]。BRG1是SWI/SNF染色质重塑复合物家族重要组成成分，含有一个具有ATP酶活性的类解旋酶亚基，通过ATP水解提供动力从而实现染色质重组[2]。BRG1已被证明在调节基因表达、细胞周期以及肿瘤发生发展上具有重要意义[3]。早期研究发现，BRG1在乳腺癌、膀胱癌、肺癌、卵巢癌等组织和细胞系中表达减少或缺失[4-5]。但是近来研究却发现，BRG1在黑色素瘤、前列腺癌和胃癌中表达升高，并且与肿瘤的进展密切相关[6-8]。BRG1在人脑胶质瘤中的表达情况在国内外尚未见报道，为了解BRG1是否参与了胶质瘤的形成过程，笔者采用组织芯片和免疫组化技术检测了BRG1在190例胶质瘤组织、8例癌旁组织以及8例正常脑组织中的表达情况，并结合临床资料分析其相关性。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集本院2008年1月-2011年12月胶质瘤手术标本190例，所有标本经病理确诊。参照WHO胶质瘤组织分类标准。将Ⅰ~Ⅱ级归为良性组、Ⅲ~Ⅳ级归为恶性组，其中良性胶质瘤组织120例，恶性70例(病理类型为：星形细胞瘤127例、胶质母细胞瘤38例、少突星形细胞瘤14例、室管膜瘤11例)。患者术前均未接受放疗、化疗及生物治疗，年龄10~73岁，平均47岁，男118例，女72例。另取正常脑组织和癌旁组织各8例作为对照。

    1.2 方法

    1.2.1 组织芯片构建 所有标本均经福尔马林溶液固定、石蜡包埋、4 μm厚连续切片，用于HE及免疫组化染色。根据HE染色切片确定具有代表性病变的部位，直径取1.0 mm，组织芯片间距1.0 mm。

    1.2.2 免疫组化法检测BRG1表达 组织芯片脱蜡至水，抗原修复后，分别加入3% H2O2和10%正常山羊血清，孵育30 min后加入兔抗人BRG1单克隆抗体(美国Santa Cruz公司)或PBS替代一抗作为阴性对照，4 ℃过夜，最后分别加入二抗和辣根过氧化物酶标记链霉卵白素，用DAB显色，苏木素复染，常规脱水封片。免疫组化超敏试剂盒、DAB显色试剂盒均购买于北京中杉金桥生物技术公司 ......