大肠癌中STAT3、Twist的表达及与EMT关系的研究*
标志物,阳性率,1资料与方法,2结果,3讨论
钟宝元大肠癌(结直肠癌)是我国常见的恶性肿瘤,其发病率有逐年增高的趋势。由于大肠癌的早期症状常不典型且不易被发现,确诊时病程已到中晚期。因此,通过研究大肠癌的发生、发展机理,为其治疗提供更多的有效手段就尤为重要。本研究分析与探讨大肠癌中STAT3、Twist的表达及与EMT的关系,具体报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2005-2011年本院结直肠癌、癌旁组织标本80例,经常规石蜡包埋与10%中性甲醛固定标本。其中男45例,女35例,年龄为32~79岁,平均(51.2±10.5)岁,组织学分级:高中分化30例,低分化50例;44例肿瘤直径未超过5 cm,36例肿瘤直径超过5 cm。
1.2 方法 选用由北京博奥森公司生产的STAT3、Twist及EMT兔抗人多克隆抗体,DAB显色试剂盒、SABC(链霉亲和素-生物素复合物)试剂盒,采用免疫组化方法,切片常规石蜡,并脱蜡至水。用3%的双氧水进行10 min的室温封闭,3次蒸馏水洗,10 min抗原修复。每5分钟PBS洗3次,再加入适量山羊血清封闭液,20 min的室温封闭,多与液体取出,滴加一抗,并在4 ℃环境下过夜。每1分钟PBS洗3次,并适量加入生物素化二抗,室温(37 ℃)封闭20 min,每2分钟PBC洗3次。DAB显色,水洗蒸馏,盐酸乙醇分化 ......
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