鸦胆子油鼻用pH敏感型原位凝胶的处方筛选(2)
1.2 试药 卡波姆934(Noveon公司，规格934NF，批号CC4llBC56)；羟丙基甲基纤维素(型号：SHE50、SHE15、SHK4M、SHK100M，西安悦来医药科技有限公司)；吐温-80(中国医药集团上海化学试剂公司，批号F20020918)；N-甲基吡咯烷酮(商品名Pharmasolve，美国国际特品公司，批号05600155942)；三乙醇胺(天津市大茂化学试剂厂)；磷酸二氢钾(西安化学试剂厂)；氢氧化钠(西安化学试剂厂)；鸦胆子油(批号：1004，佛山市南海中南药化厂，总酸按油酸计>90%)，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 实验方法
2.1.1 人工鼻液的配制 精密称取磷酸二氢钾13.6 g，加去离水1 L溶解，用0.1 mol/L(4 g/L)氢氧化钠溶液调至pH6.8[14]。
, http://www.100md.com 2.1.2 凝胶基质的配制 为避免卡波姆与羟丙基甲基纤维素在溶解过程中发生相互作用，凝胶基质采用分别溶解再混合的方法。以配制含0.5%卡波姆、0.5%羟丙基甲基纤维素凝胶基质为例。称取卡波姆1 g，量取蒸馏水100 mL，将卡波姆缓慢撒入搅拌的蒸馏水中，加完后继续搅拌0.5 h，放置24 h，使其充分溶胀，得1.0%卡波姆溶液100 mL。羟丙基甲基纤维素溶液配制法同上。以上两种基质溶液等体积混合，得0.5%卡波姆、0.5%羟丙基甲基纤维素凝胶基质。
2.1.3 转子型号、转速的选择 在前期预实验的基础上，以2%卡波姆的黏度测定为依据，64号转子以60 r/min测定其黏度为8.2 Pa·s，而其他转子(62号、63号、71号、72号)因与凝胶基质之间阻力较大不能测出其黏度，故该实验均选择64号转子进行黏度测定。表1是0.5%卡波姆溶液在不同转速下测定的黏度值，实验表明转速越大扭距越大，当扭距值低于10.0%时，无法获得精确的黏度值，需通过改变转速或转子使能获得精确的黏度值，因而本实验均选择60 r/min为最佳转速。
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2.1.4 黏附性的测定 黏膜黏附性是鼻用原位凝胶一个重要的考察因素，黏附力增强可以减小鼻纤毛对原位凝胶的清除率，提高凝胶在鼻腔中的保留时间，但过强的黏附性会影响纤毛的运动，对鼻黏膜造成损害。本实验取洁净的20 cm×10 cm玻璃板一块，在玻璃板上滴凝胶2滴，使玻璃板成45°，测量1 min后凝胶在玻璃板上流动的距离。作为评价黏附性的指标。评判标准为：流动距离为0.1～0.3 cm时，其黏性适宜，流动性小；流动距离<0.1 cm时，其黏度过大不适合鼻腔给药；当流动距离>0.3 cm时，凝胶流动性过大。本实验以流动距离为0.1～0.3 cm作为凝胶基质黏附性的筛选标准。
2.1.5 pH对基质成型性的影响 以卡波姆934，羟丙基甲基纤维素SHE15为待筛选基质，制备含0.5%卡波姆、0.5%羟丙基甲基纤维素的凝胶基质，以三乙醇胺调节pH，固定转速60 r/min，测定不同pH下的凝胶黏度，见表2。实验结果证明混合基质的黏度随着pH的增大而增大，当pH达到4.0以上时，羧基开始解离，负电荷间的排斥作用导致分子链膨胀、伸展，分子链相互缠结而形成具有一定强度和弹性的半透明状凝胶。
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2.1.6 最佳pH的筛选 配制含0.5%卡波姆934、0.5%羟丙基甲基纤维素SHE15的凝胶基质，以三乙醇胺调pH，制得原位凝胶，再以人工鼻液调节pH，测定凝胶黏度，见表3。鼻黏液pH一般在5.5～7.0之间，该实验以人工鼻液调节pH5.5、6.0、6.5。由以上实验可知，将混合基质溶液用三乙醇胺调pH4.0、4.5、5.0可制得凝胶，但当以三乙醇胺调pH为5.5时，黏度过大无法测定。从基质是否易被人工鼻液中和及鼻腔给药角度考虑，三乙醇胺调节基质pH为5.0时最合适。综上所述，用三乙醇胺调pH5.0为最佳，同时应降低基质浓度。
2.1.7 基质浓度的筛选 前面预实验可知，0.5%卡波姆934，0.5%羟丙基甲基纤维素SHE15作为制备pH敏感型鼻用原位凝胶制剂的混合基质，其黏度过大，黏度计无法测出，不适于鼻腔给药。因而降低卡波姆或羟丙基甲基纤维素浓度可减小凝胶黏度。配制含0.25%卡波姆934、0.5%羟丙基甲基纤维素SHE15的混合基质，以三乙醇胺调pH5.0，制得原位凝胶，再以人工鼻液调节pH，测定凝胶黏度，见表4。由上述实验可知当人工鼻液调得pH为5.5时，其黏度为1.6 Pa.s的凝胶，其流动距离>0.3 cm。相关文献[9]报道，羟丙基甲基纤维素的黏度受pH的影响不明显，故本实验拟采取0.5%卡波姆，而降低羟丙基甲基纤维素浓度。
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配制含0.5%卡波姆934，0.25%羟丙基甲基纤维素SHE15的混合基质，以三乙醇胺调pH5.0，制得原位凝胶，再以人工鼻液调节pH，测定凝胶黏度，见表5。结果显示以0.5%卡波姆934，0.25%羟丙基甲基纤维素SHE15为处方制得的凝胶用人工鼻液中和后黏度为4.8 Pa·s，其流动距离在0.1～0.3 cm，适于鼻腔给药。
2.1.8 不同型号羟丙基甲基纤维素的筛选 固定卡波姆934浓度为0.5%，分别将0.25%羟丙基甲基纤维素SHK100M、0.25%羟丙基甲基纤维素SHK4M、作为增黏剂制备原位凝胶，结果制备的凝胶黏度均过大，不宜用于鼻腔给药。而将0.25%羟丙基甲基纤维素SHE50作为增黏剂制备凝胶，与人工鼻液中和，其黏度为5.8 Pa·s，流动距离为0.1～0.2 cm，较处方0.5%卡波姆934，0.25%羟丙基甲基纤维素SHE15制备的凝胶有更大的黏度，更适合用于鼻腔给药，见表6。
2.1.9 增溶剂的筛选 鸦胆子油的水溶性差，加入适量增溶剂，才能制备出澄明制剂。吐温-80水溶性强，广泛用作增溶剂，N-甲基吡咯烷酮是一类高效的增溶剂，且毒性小。实验表明，单用吐温-80或N-甲基吡咯烷酮都无法使制剂完全澄明，而将两者混合使用能取得更好的增溶效果。本实验以吐温-80、N-甲基吡咯烷酮为混合增溶剂，以吐温-80用量、N-甲基吡咯烷酮用量两项为考察因素，以溶液的澄明度(肉眼观察制剂为澄明)为评价指标，确定处方中混合增溶剂的组成及用量。结果，吐温-80 10.44 g、N-甲基吡咯烷酮2.18 g，加入5 mL鸦胆子油中，鸦胆子油完全溶解。, 百拇医药(宋逍)
2 方法与结果
2.1 实验方法
2.1.1 人工鼻液的配制 精密称取磷酸二氢钾13.6 g，加去离水1 L溶解，用0.1 mol/L(4 g/L)氢氧化钠溶液调至pH6.8[14]。
, http://www.100md.com 2.1.2 凝胶基质的配制 为避免卡波姆与羟丙基甲基纤维素在溶解过程中发生相互作用，凝胶基质采用分别溶解再混合的方法。以配制含0.5%卡波姆、0.5%羟丙基甲基纤维素凝胶基质为例。称取卡波姆1 g，量取蒸馏水100 mL，将卡波姆缓慢撒入搅拌的蒸馏水中，加完后继续搅拌0.5 h，放置24 h，使其充分溶胀，得1.0%卡波姆溶液100 mL。羟丙基甲基纤维素溶液配制法同上。以上两种基质溶液等体积混合，得0.5%卡波姆、0.5%羟丙基甲基纤维素凝胶基质。
2.1.3 转子型号、转速的选择 在前期预实验的基础上，以2%卡波姆的黏度测定为依据，64号转子以60 r/min测定其黏度为8.2 Pa·s，而其他转子(62号、63号、71号、72号)因与凝胶基质之间阻力较大不能测出其黏度，故该实验均选择64号转子进行黏度测定。表1是0.5%卡波姆溶液在不同转速下测定的黏度值，实验表明转速越大扭距越大，当扭距值低于10.0%时，无法获得精确的黏度值，需通过改变转速或转子使能获得精确的黏度值，因而本实验均选择60 r/min为最佳转速。
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2.1.4 黏附性的测定 黏膜黏附性是鼻用原位凝胶一个重要的考察因素，黏附力增强可以减小鼻纤毛对原位凝胶的清除率，提高凝胶在鼻腔中的保留时间，但过强的黏附性会影响纤毛的运动，对鼻黏膜造成损害。本实验取洁净的20 cm×10 cm玻璃板一块，在玻璃板上滴凝胶2滴，使玻璃板成45°，测量1 min后凝胶在玻璃板上流动的距离。作为评价黏附性的指标。评判标准为：流动距离为0.1～0.3 cm时，其黏性适宜，流动性小；流动距离<0.1 cm时，其黏度过大不适合鼻腔给药；当流动距离>0.3 cm时，凝胶流动性过大。本实验以流动距离为0.1～0.3 cm作为凝胶基质黏附性的筛选标准。
2.1.5 pH对基质成型性的影响 以卡波姆934，羟丙基甲基纤维素SHE15为待筛选基质，制备含0.5%卡波姆、0.5%羟丙基甲基纤维素的凝胶基质，以三乙醇胺调节pH，固定转速60 r/min，测定不同pH下的凝胶黏度，见表2。实验结果证明混合基质的黏度随着pH的增大而增大，当pH达到4.0以上时，羧基开始解离，负电荷间的排斥作用导致分子链膨胀、伸展，分子链相互缠结而形成具有一定强度和弹性的半透明状凝胶。
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2.1.6 最佳pH的筛选 配制含0.5%卡波姆934、0.5%羟丙基甲基纤维素SHE15的凝胶基质，以三乙醇胺调pH，制得原位凝胶，再以人工鼻液调节pH，测定凝胶黏度，见表3。鼻黏液pH一般在5.5～7.0之间，该实验以人工鼻液调节pH5.5、6.0、6.5。由以上实验可知，将混合基质溶液用三乙醇胺调pH4.0、4.5、5.0可制得凝胶，但当以三乙醇胺调pH为5.5时，黏度过大无法测定。从基质是否易被人工鼻液中和及鼻腔给药角度考虑，三乙醇胺调节基质pH为5.0时最合适。综上所述，用三乙醇胺调pH5.0为最佳，同时应降低基质浓度。
2.1.7 基质浓度的筛选 前面预实验可知，0.5%卡波姆934，0.5%羟丙基甲基纤维素SHE15作为制备pH敏感型鼻用原位凝胶制剂的混合基质，其黏度过大，黏度计无法测出，不适于鼻腔给药。因而降低卡波姆或羟丙基甲基纤维素浓度可减小凝胶黏度。配制含0.25%卡波姆934、0.5%羟丙基甲基纤维素SHE15的混合基质，以三乙醇胺调pH5.0，制得原位凝胶，再以人工鼻液调节pH，测定凝胶黏度，见表4。由上述实验可知当人工鼻液调得pH为5.5时，其黏度为1.6 Pa.s的凝胶，其流动距离>0.3 cm。相关文献[9]报道，羟丙基甲基纤维素的黏度受pH的影响不明显，故本实验拟采取0.5%卡波姆，而降低羟丙基甲基纤维素浓度。
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配制含0.5%卡波姆934，0.25%羟丙基甲基纤维素SHE15的混合基质，以三乙醇胺调pH5.0，制得原位凝胶，再以人工鼻液调节pH，测定凝胶黏度，见表5。结果显示以0.5%卡波姆934，0.25%羟丙基甲基纤维素SHE15为处方制得的凝胶用人工鼻液中和后黏度为4.8 Pa·s，其流动距离在0.1～0.3 cm，适于鼻腔给药。
2.1.8 不同型号羟丙基甲基纤维素的筛选 固定卡波姆934浓度为0.5%，分别将0.25%羟丙基甲基纤维素SHK100M、0.25%羟丙基甲基纤维素SHK4M、作为增黏剂制备原位凝胶，结果制备的凝胶黏度均过大，不宜用于鼻腔给药。而将0.25%羟丙基甲基纤维素SHE50作为增黏剂制备凝胶，与人工鼻液中和，其黏度为5.8 Pa·s，流动距离为0.1～0.2 cm，较处方0.5%卡波姆934，0.25%羟丙基甲基纤维素SHE15制备的凝胶有更大的黏度，更适合用于鼻腔给药，见表6。
2.1.9 增溶剂的筛选 鸦胆子油的水溶性差，加入适量增溶剂，才能制备出澄明制剂。吐温-80水溶性强，广泛用作增溶剂，N-甲基吡咯烷酮是一类高效的增溶剂，且毒性小。实验表明，单用吐温-80或N-甲基吡咯烷酮都无法使制剂完全澄明，而将两者混合使用能取得更好的增溶效果。本实验以吐温-80、N-甲基吡咯烷酮为混合增溶剂，以吐温-80用量、N-甲基吡咯烷酮用量两项为考察因素，以溶液的澄明度(肉眼观察制剂为澄明)为评价指标，确定处方中混合增溶剂的组成及用量。结果，吐温-80 10.44 g、N-甲基吡咯烷酮2.18 g，加入5 mL鸦胆子油中，鸦胆子油完全溶解。, 百拇医药(宋逍)