siRNA干扰SIAH对细胞活性和α—synuclein泛素化降解通路的影响(1)
siRNA干扰SIAH对细胞活性和α—synuclein泛素化降解通路的影响,帕金森病,E3泛素连接酶,α-synuclein,泛素化蛋白酶体
【摘要】 目的：研究siRNA干扰SIAH基因对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞α-synuclein泛素化、降解通路的影响。方法：用荧光标记的siRNA-FAM转染SH-SY5Y细胞后，专业设计合成3条针对SIAH的siRNA，Western Blot检测蛋白水平SIAH表达的变化，筛选出其中最高效的1条siRNA，用CCK-8法检测该siRNA-SIAH干扰SH-SY5Y细胞活性；流式细胞技术检测该siRNA-SIAH干扰SH-SY5Y细胞凋亡的影响；Western Blot检测α-synuclein、LC3、E1、P53蛋白水平表达的变化；qRT-PCR检测SIAH、α-synuclein、LC3、E1 mRNA水平表达的变化；免疫共聚焦分别检测SIAH、α-synuclein、LC3共定位情况。结果：3条siRNA均成功转染SH-SY5Y细胞 ......
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