1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 成年Wistar大鼠，雄性，体重(200±50)g，购于兰州大学实验动物中心，动物合格证号：SCXK(甘)2013-0002。

    1.1.2 主要试剂 DMEM/F12培养基及0.25%胰蛋白酶(购自Gibco公司)。胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)购自Hyclone公司。B27添加剂购自Invitrogen公司。表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)购自Peprotech公司，小鼠抗Nestin抗体、兔抗GFAP抗体、小鼠抗Galc抗体购自Chemicon公司，小鼠抗MAP2抗体、兔抗β-tubulin Ⅲ抗体购自Abcam公司，兔抗CD133抗体购自Santa Cruz公司。Alexa Fluor 488山羊抗小鼠IgG、Alexa Fluor 594标记羊抗兔IgG和Alexa Fluor 488山羊抗兔IgG购自Molecular Probes公司 ......