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编号:12730924
miR—370对肝细胞癌的作用及临床研究(2)
http://www.100md.com 2015年10月25日 《中国医学创新》 2015年第30期
     1 资料与方法

    1.1 一般资料 本研究共纳入肝癌手术患者55例,均为本院2009年1月-2015年1月收住入院的病例,均经病理诊断符合肝细胞癌诊断标准[5]。另外,25例正常肝组织来源于同时期内进行肝血管瘤手术的病例,同样经病理诊断符合血管瘤诊断标准[6]。

    1.2 使用试剂 Trizol、Ambion RNA 抽提试剂盒、逆转录试剂 Super ScriptⅢ、RNA 酶抑制剂(RRI)、肝素、牛血清白蛋白(BSA)、PBS等。

    1.3 标本收集 收集的新鲜组织标本均在10 min内处理,每个组织样本均先置于液氮中快速冷冻,然后置于-80 ℃冰箱内保存待用。所有肝癌组织采集后经病理检查均证实为肝癌组织,而切缘则未发现肿瘤细胞。癌旁组织采集至少距肿瘤边缘5 cm以上,并经病理检查未发现有肝癌细胞。

    1.4 研究方法 采用Real-time PCR法检测肝癌组织、癌旁组织以及正常肝组织中miR-370水平的表达。反应体系如下:SYBR 7.5 μL、cDNA 1.0 μL、PCR primer F(10 μM)0.15μL、PCR primer R(10 μM)0.15 μL、Nuclease-Free Water 5.7 μL ......
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