比较3种不同储存条件对纯钛SLA表面生物学性能的影响(2)
1.2.2 不同储存条件下钛片的生物活性变化情况1.2.2.1 蛋白质吸附情况 选择牛血清白蛋白作为模型蛋白,并将300 μL浓度为1 mg/mL的蛋白质溶液转移到不同组别钛片表面,在37 ℃条件下孵育1 h,弃去未吸附的蛋白液后,将其与微喹啉二甲酸继续混合并在相同条件下孵育0.5 h。在562 nm的波长下测定OD值、绘制标准曲线,并据此计算蛋白质吸附量。
1.2.2.2 MG63成骨细胞的黏附与增殖情况 MG63成骨细胞株经培养、传代、接种并冲洗、消化、离心、重悬等处理后,通过对MG63成骨细胞悬液进行细胞计数,按照操作要求调整细胞浓度,然后接种于不同组别钛片表面,于37 ℃、5%二氧化碳浓度的细胞培养箱中进行培养、换液,至实验时点后经漂洗、多聚甲醛处理、常温固定、缓冲液再次漂洗、通透细胞、荧光剂染色、漂洗、干燥等一系列处理后,在专业的显微镜成像系统中随机选取10个视野进行图像采集,计算并统计钛片上吸附细胞的数目。同时,选择MTS试剂盒对MG63成骨细胞在不同组别钛片上的增殖情况进行检测。
1.2.2.3 不同钛片表面的碱性磷酸酶活性 通过碱性磷酸酶(ALP)试剂盒对不同组别钛片上的MG63成骨细胞ALP活性进行测定,检测使用酶标仪,检测波长为405 nm ......
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