1 材料与方法

    1.1 主要材料和试剂 人肾小管上皮细胞(HK-2)(中国科学院上海生命科学研究院)；Recombinant Human TGF-β1(PEPROTECH)；DMEM/F12(HyClone)；胎牛血清(Scien Cell)；FoxO3a-siRNA、Control-siRNA、FoxO3a抗体、E-cadherin抗体、β-Catenin抗体(Cell Signaling)；α-SMA抗体(Abcam)鼠抗GAPDH抗体、辣根酶标记山羊抗兔IgG、辣根酶标记山羊抗鼠IgG、FITC标记山羊抗兔IgG(北京中杉金桥)；CY3-羊抗兔IgG(博士德生物)。Lipofectamine RNAiMAX (invitrogen)。

    1.2 HK-2细胞培养 配制含有10%胎牛血清及1%青链霉素的DMEM/F12完全培养基，将细胞置于5% CO2、37 ℃的环境下培养。使用0.05%的胰酶含EDTA进行传代，每3～4天传代一次。待细胞的融合率达到20%～30% ......