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编号:13047089
等温核酸扩增技术进展(2)
http://www.100md.com 2017年6月5日 《中国医学创新》 2017年第16期
     2.3 滚环扩增技术 滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)是借鉴自然界中环状DNA分子滚环式特定复制方式建立的等温扩增技术[9]。RCA线性扩增是在DNA聚合酶作用下,环状DNA与引物结合后进行延伸,生成大量与环状DNA互补的重复序列的线状DNA单链。指数RCA采用与环状DNA序列一致的第二种引物,此引物与线性RCA产物结合并酶促延伸,产物又作为第一种引物的模板进行反应,因此使产物能在短时间内呈指数扩增。指数RCA也可用于非环状DNA的扩增。RCA很明显的缺点是其线性RCA只能用于检测一些具有环状核酸的病毒、质粒和环状染色体等,而合成指数RCA锁式探针的成本高及检测时存在信号背景问题[10]。

    RCA被用于扩增及检测DNA及RNA的单核苷酸多态性(SNPs)[11-12],这是第一个完成从双螺旋DNA或者mRNA转变为单链DNA的检测方法。目前已经用RCA技术发展了TempliPhi DNA测序模板扩增试剂盒。在腫瘤的早期核酸检测和检测分析,RCA也是一个很有潜力的分析工具。

    2.4 环介导等温扩增技术 环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification ......
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