小鼠胚胎心动脉囊的发生发育(2)
本研究用抗α-平滑肌肌动蛋白(SMA)抗体标记早期分化的心肌细胞和平滑肌细胞[10-11],用抗ISL1抗体标记第二生心区细胞[12-13],用抗心肌肌球蛋白重链(MHC)抗体标记心肌,对ED9~13小鼠头胸部的切片进行HE和免疫组织化学染色,观察了动脉囊的发生发育及转归。现报道如下。1 材料与方法
1.1 标本制作 购买山西医科大学实验动物中心足3月龄健康雌性中国昆明小鼠32只,体重23~32 g,在明暗相间条件下自由进食饮水饲喂(明:7 am~7 pm),动情期与同种3月龄健康雄性小鼠于7∶30 pm合笼,次晨分笼,发现阴栓者即为妊娠0.5 d。乙醚麻醉妊娠小鼠,剖腹收集ED9~13胚胎,ED9胚胎带子宫固定,其余胚龄胚胎从子宫内剥离出后固定。标本经甲醇:丙酮:水(2∶2∶1 v/v)混合固定液室温下固定24 h后梯度乙醇、正丁醇脱水透明,石蜡包埋。取不同胚龄胚胎5~7只,制作为8 μm厚连续石蜡切片,每4片取1片做HE染色以观察各胚胎的形态结构,选出头胸部的切片用于免疫组织化学PAP法染色。载玻片经多聚赖氨酸处理 ......
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