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编号:13106967
PTK7在不同级别结肠腺瘤组织及瘤旁非肿瘤黏膜组织中的表达意义(2)
http://www.100md.com 2017年9月25日 《中国医学创新》 2017年第27期
     1.2 方法

    1.2.1 检测标本 由首都医科大学大兴医院提供。

    1.2.2 免疫组织化学方法检测 标本经4%甲醛固定常规脱水、石蜡包埋,4 μm切片,常规HE染色,置于3%过氧化氢15 min以消除内源性过氧化物酶的活性。用EDTA(pH值8.0)(中国北京中山金桥生物技术有限公司)高压修复抗原。待冷却至室温后,用5%脱脂牛奶封闭切片1 h,之后孵育浓缩型兔多克隆抗体anti-ptk7(1∶7500,sab3500340,Sigma)在4 ℃过夜。应用兔/鼠通用型二抗(EnVisionTM Detection System Peroxidase/DAB,Dako),用现配的DAB显色液(中国北京中山金桥生物技术有限公司)显色,用苏木素复染核。

    1.3 观察指标与判定标准 (1)免疫组织化学染色结果判断:PTK7染色结果及评分由两名高年资病理医生独立盲评。PTK7染色的免疫组化评分标准判定,分别按照染色阳性细胞百分数(PP)和染色强度(SI)进行计分。PP:0分(无);1分(<25%);2分(25%~75%);3分(>75%)。SI:0分(无);1分(弱);2分(中);3分(强) ......
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