Treg与Th17细胞在慢性丙型肝炎患者外周血CD4+细胞中的表达变化及意义(2)
1.2 仪器与设备 BD FACS Calibur流式细胞仪(美国BD公司)、YS72 5KVA净化式交流稳压电源(中国上海科技仪器仪表厂)、HH·W21·600-S电热数显恒温水浴箱(中国跃进医疗器械厂)。1.3 试剂 主要试剂:FOXP3-PE,CD4-FITC,CD25-APC,PE Rat IgG2a,IL-17-PE单抗购自COULTER公司,CD3-PerCP、CD4-APC、CD3-APC
购自BD公司,鼠FITC-IgG1/PE-IgG1单抗为Pharming公司产品。其他试剂:PMA、Ionomycin、BFA等均购自Sigma公司,RPMI1640购自Gibco公司,固定穿透试剂盒,Cytopem kit购PharMingen公司。
1.4 方法
1.4.1 首先,选择合适的健康人群,分别采取静脉血1 mL,使用肝素作为最佳抗凝剂。两者混匀后,按抗凝后静脉血同RPMI1640(无血清)的培养基按照1∶1的比例在振荡器上充摇混匀 ......
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