张丽 何洪敏 张楠

    前列腺腺癌是一类严重危害男性健康的疾病，在过去几十年中，前列腺腺癌的发病人数持续上升。其发生发展是一个长期的、多因素的复杂的过程。近年来的研究发现，Wnt信号通路及其抑制剂分泌型卷曲相关蛋白1(Secreted Frizzled-related Proteins 1，SFRP1)与前列腺腺癌的发生发展密切相关。Wnt信号通路由Wnts基因调控，通过Wnt相关蛋白与其位于细胞表面的受体结合来完成对细胞间生长、发育信号的转导和调控[1]。Wnt信号通路的关键蛋白及调控蛋白在多种不同的前列腺癌细胞中存在着表达差异[2]。Thiele等[3]在前列腺癌细胞株中对SFRP1从mRNA水平进行了相关的研究。Wnt信号通路中涉及很多因子，而作为SFRP家族成员之一的SFRP1是Wnt信号通路的负性调节剂，它通过干扰配体和受体间的相互作用而阻断Wnt信号通路[4]。目前国内外有关SFRP1蛋白在前列腺腺癌中研究报道较少，本研究应用免疫组化PV二步法分别检测52例前列腺腺癌和68例良性前列腺增生组织中SFRP1蛋白的表达情况，并分析其与前列腺腺癌临床病理参数之间的关系，以探讨其在前列腺腺癌发生、发展中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料 选取2014年1月-2016年10月枣庄市立医院病理科存档的经穿刺、电切或手术切除的男性前列腺腺癌石蜡包埋组织52例。每例标本均经两名主治医师及以上的病理医师阅片确认。患者年龄53～82岁，中位年龄68岁；术前血清PSA值18.6～100 ng/mL，平均(58.6±27.4)ng/mL；所有患者术前均未进行放化疗及内分泌治疗；Gleason评分5～6分(中分化)17例，Gleason评分7～10分(低分化)35例；根据WHO的TNM分期，Ⅰ期+Ⅱ期(T1、T2期)23例，Ⅲ期+Ⅳ期(T3、T4期)29例；有骨转移者18例，无骨转移者34例。选取同期存档的68例经病理诊断及免疫组化证实的良性前列腺增生的石蜡包埋组织做对照。

    1.2 主要试剂 兔抗人SFRP1多克隆抗体购自美国santa cruz公司(工作浓度为1∶100)，PV-9000检测试剂盒及DAB显色试剂盒均购于北京中杉公司。

    1.3 方法 采用免疫组织化学PV-9000两步法，所有蜡块进行厚4 μm的切片后脱蜡至水。后滴加3%H2O2室温孵育10 min以灭活内源性过氧化物酶的活性。经抗原热修复后，室温放置自然冷却，滴加一抗，4 ℃过夜。PBS缓冲液冲洗2 min×3次，滴加内源性过氧化物酶阻断剂 ......