mTOR信号通路的激活在左旋多巴诱发异动症中的作用及机制研究(3)
1.4 免疫组织化学检测AMPA受体亚基GluR1、GluR2水平 取保存好的大鼠纹状体石蜡切片,中温50 ℃烘烤溶解,冷却后酒精去蜡,置于蒸馏水中清洗15 min后以高温75 ℃浸泡15 min,然后以PBS漂洗3次,置于准备好的试管中以封闭液封闭。2 h后滴入单抗GluR1(1︰50)、GluR2(1︰3 000),4 ℃孵育过夜。37 ℃保温半小时,取出PBS漂洗3次,然后滴入IgG抗体(1︰200)150 ?L,置于室温中,2 h后PBS漂洗3次,玻片滤干后室温下滴入显色剂,首次染色完毕后漂洗,滴入第二次显色剂,室温干燥过夜,脱水后以pH 7.0树脂封玻片,在光学显微镜下高倍视野观察GluR1、GluR2阳性细胞。1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0软件,对所得数据进行统计分析,计量资料用(x±s)表示,两两比较采用t检验,多组间比较采用F检验;计数资料以率(%)表示,比较采用字2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 模型制备情况 对照组10只大鼠均完成各项实验研究;50只研究组大鼠成功制备为PD模型36只 ......
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