1.2 主要试剂 兔源CNPY2一抗，美国proteintech公司；β-actin内参一抗及抗兔二抗，美国santa-cruz公司；CD34一抗，北京中杉金桥生物公司；组织裂解液及BCA蛋白定量试剂盒，上海碧云天生物公司；蛋白分子量marker，武汉博士德生物公司；硝酸纤维素膜，北京索莱宝生物公司；甲叉双丙烯酰胺、过硫酸铵、四甲基乙二胺等其余试剂为国产分析纯产品。

    1.3 蛋白印迹实验 提取组织总蛋白：电子天平称取组织0.5 g，眼科剪剪碎后加组织裂解液，于冰上匀浆，低温离心取上清液，按照BCA蛋白定量检测试剂盒步骤检测蛋白浓度。SDS-PAGE凝胶电泳：配制分离胶及浓缩胶，灌胶至玻璃板中，凝固后上样加入蛋白样品及蛋白分子量marker。加入电泳缓冲液，预电泳30 min，电压60 V。电泳45 min，电压120 V。湿转膜：将凝胶及硝酸纤维素膜夹至转膜板中，加入转移缓冲液，转膜25 min，电压100 V。蛋白封闭：将裁好的膜置于5%蛋白干粉封闭液中，室温轻摇1 h。显色：CNPY2(1︰1 000)及β-actin(1︰1 000)一抗 ......