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编号:13267598
可溶型小鼠细胞因子LIGHT/TNFSF14的原核表达、纯化及活性验证(2)
http://www.100md.com 2018年11月15日 《中国医学创新》 2018年第32期
     本课题组前期的研究发现LIGHT还能够调控脂肪前体细胞的分化,脂肪前体细胞中过表达LIGHT能够明显抑制其向白色脂肪细胞和米黄色脂肪细胞的分化。脂肪细胞的增生和肥大是引起肥胖的最直接原因,因此进一步明确LIGHT调控脂肪前体细胞分化以及脂类代谢的机制,将为防治肥胖提供有力的理论支持[16]。

    为便于研究LIGHT调控脂肪细胞分化及脂类代谢的机制,本研究拟通过基因克隆、大肠杆菌表达以及亲和纯化,對小鼠LIGHT胞外段进行异源表达纯化;而已有报道表明,人源的LIGHT胞外段能够抑制人结肠癌细胞的生长[17]。因此本实验中利用小鼠结肠癌细胞CMT93增殖实验检测所制备的可溶型小鼠LIGHT重组蛋白的活性。现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料 小鼠(C57BL/6)由本校实验动物中心养殖;小鼠脾脏、血液、肝脏、皮肤总cDNA由本实验室获得。大肠杆菌DH5α和BL21由本实验室保存;小鼠结肠癌细胞CMT93由本实验室保存。表达载体pGEX4T-1由本实验室保存 ......
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