EV71病毒可引起神经系统以及呼吸系统损伤，其中肺水肿是该病最严重的并发症以及主要死因，致死致残率较高，已严重威胁儿童的身体健康和生命安全。但目前对EV71具体致病机制仍不清楚，尤其是具体每个衣壳蛋白的功能以及作用于细胞的信号通路，再者临床上尚未发现安全有效的疫苗来预防EV71的感染。鉴于此，本文对肠道病毒EV71的衣壳蛋白基因进行体外克隆并在大肠杆菌中表达。现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 质粒与菌种 pET-14b、大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)均由本室保存，EV71病毒全长模板由北京军事医学科学院疾病预防控制所宋宏彬教授馈赠。

    1.2 主要试剂 引物由华大基因有限公司合成。限制性内切酶(Kpn I、Not I)购自TaKaRa公司;高保真DNA聚合酶KOD plus neo、Ligation High连接酶是Toyobo公司产品，100 bp和1 kD DNA ladder购自Axygen公司;异丙基-β-D-硫代半乳糖(isopropyl-β-D-thiogalactoside ......