【摘要】 目的：构建EV71基因的原核表达载体，并在原核细胞中进行表达与纯化。方法：根据已知EV71全长核酸序列设计引物，用PCR方法扩增VP1、VP2、VP3和VP4四个基因片段，对目的基因进行酶切并克隆至pET-14b原核表达载体中，转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，IPTG诱导表达;所获得的不可溶性蛋白经尿素裂解超声，亲和层析纯化，用SDS-PAGE检测表达产物。结果：测序证实原核重组质粒构建成功;可表达高纯度的四个蛋白，且蛋白大小与预计值相符。结论：成功构建了手足口病主要致病原肠道病毒71型(EV71)的四个衣壳蛋白VP1、VP2、VP3和VP4的原核表达载体，并纯化得到高纯度的四个蛋白，为进一步研究手足口病致病机制奠定了基础。

    【关键词】 EV71; 基因克隆; 蛋白表达

    Gene Clone and Expression of Capsid Proteins of EV71-the Main Pathogen of HFMD/LIANG Jie ......