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编号:13389481
miR-424在胃癌组织中的表达及其临床意义(2)
http://www.100md.com 2019年3月5日 《中国医学创新》 2019年第7期
     1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2016年2月-2017年2月本院收治的55例胃癌患者的胃癌组织样本,均经病理证实为胃癌,术前均未接受放疗、化疗等辅助治疗,且有完整临床病理资料;同时取对应癌旁组织(距癌组织边缘≥5 cm)为对照组,均经病理证实为正常胃组织。本研究得到本医院医学伦理委员会同意。

    1.2 方法

    1.2.1 试剂与设备 逆转录试剂盒、RT-PCR试剂盒购由美国Sigma公司提供;TRIzol试剂购由碧云天生物技术研究所提供;miR-424、β-Actin引物购于上海生工生物工程有限公司。

    1.2.2 RT-PCR检测胃癌及癌旁组织中miR-424 mRNA表达 具体检测方法:将冷冻的胃癌组织及癌旁周围正常组织匀浆,Trizol法提取胃癌及癌旁组织中总RNA,向RNA沉淀中加入焦炭酸二乙酯,静置于冰上30 min,置于-80 ℃保存;测定样品中RNA的纯度、浓度,取适量RNA反应物行逆转录合成cDNA(反转录程序:30 ℃反应10 min,42~60 ℃反应30 min,85℃和5 ℃分别反应5 min) ......
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