童细焱 赵泰成

    帕金森病(Parkinson’s disease，PD)又称震颤麻痹，是一种多发于中老年人的神经系统变性疾病，以中脑黑质致密带腹外侧部的多巴胺能神经元大量变性和进行性缺失，以及神经元胞浆中Lewy 小体形成为特征性病理改变。神经疾病现在是全球残疾的主要来源，而世界上增长最快的神经疾病是帕金森病。随着社会老龄化，预计到2040 年将达到1 200 万以上[1-2]。PD 的研究已有190 多年，但其病因及致病机制仍未彻底明确，目前可能的相关因素有老龄化、环境工业和农业污染、遗传因素、线粒体功能障碍、氧化应激和泛酸-蛋白酶体系统功能异常等[3]。

    miRNA-451 是近年发现的一种多功能miRNA，目前已证实其在血液系统疾病、神经发育、心血管疾病及肿瘤等方面具有重要作用。研究者在对帕金森病轻度认知障碍患者的血浆外泌体miRNA 筛选分析中发现miRNA-451 在帕金森患者血浆外泌体中的表达明显高于健康对照组[4]。但是miRNA-451在PD 发生与进展中的作用机制尚不明确。

    本研究以鱼藤酮处理PC12 细胞建立的帕金森病细胞模型为研究对象，通过瞬时转染技术，在PC12 细胞损伤模型中分别抑制和增强miRNA-451的 表达，采用Real-time PCR 检测miRNA-451对Bcl-2、Bax 的表达水平的影响，旨在分析miRNA-451 对帕金森病细胞模型凋亡的影响，为以miRNA-451 为靶点的帕金森病治疗提供新线索。

    1 材料与方法

    1.1 材料 PC12 细胞系购买于凯基生物技术股份有限公司。

    1.2 主要试剂及仪器 胎牛血清(四季青)；DMEM 培养基、胰蛋白酶(Gibco 公司)；鱼藤酮(rotenone)、二甲基亚砜(Sigma 公司)；miRNA-451模拟物(miRNA-451 mimics)、miRNA-451 抑制剂(miRNA-451-inhibitor)、无义序列及实时荧光定量PCR 所需引物(均由上海生物工程有限公司合成)；总RNA 提取试剂盒(北京TIANGEN 公司提供)；Lipofectamine 2000、Trizol 试剂(invitrogen 公司)；逆转录试剂盒(TaKaRa 公司) ......