王斐斐，李炜，贺礼琴，白昌儒，董明清，王娟毅*

    1.西安交通大学附属三二〇一医院 肿瘤内科，陕西 汉中 723000

    2.空军军医大学 基础医学院，陕西 西安 710032

    胃癌是我国发病率第5 位的肿瘤，也是导致肿瘤相关死亡的第3 大原因[1]。超过90%的胃癌患者在诊断时已出现远处转移[2]。放疗、化疗、靶向治疗是出现转移胃癌的主要治疗方法，但化疗药物特异性较低，且不良反应明显[3-4]。因此，寻找更为安全高效的治疗药物具有重要意义。

    氧化苦参碱是从苦参干燥根、果实中提取的一种醌类生物碱，是苦参碱的主要有效成分，具有抗炎、抗肿瘤等多种药理作用[5-6]。研究表明，氧化苦参碱是一种天然抗癌药物，能够显著抑制癌细胞增殖、影响多种恶性肿瘤的发生和进展[6]。已证实，氧化苦参碱可对胃癌BGC-823 细胞及胃癌HGC-27细胞裸鼠移植瘤模型发挥抑制生长作用[7-8]。课题组组前期也报道了苦参碱可通过血管内皮生长因子-C(VEGF-C)/血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)和核因子-κB(NF-κB)/Toll 样受体4(TLR4)信号通路保护大鼠的胃黏膜损伤[9]。最近研究表明，氧化苦参碱可以通过调节microRNA(miRNA)的表达来发挥其抗肿瘤作用[10-11]。miRNA 是内源性单链非编码RNA，与靶miRNA 的3 个非翻译区域结合，可以在转录后水平调节基因表达。研究表明，miR-155-5p 在肝癌、食管癌等消化系统肿瘤中高度表达，并且与预后不良相关[12-13]。然而，目前尚不清楚miR-155-5p 是否在胃癌中过度表达，以及氧化苦参碱是否可通过调节miR-155-5p 在胃癌中的表达以抑制肿瘤进展。基于此，本研究探讨了氧化苦参碱对胃癌细胞中miR-155-5p 表达、胃癌细胞生物学行为及miR-155-5p 靶基因对封闭蛋白1(Claudin 1)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和c-Myc 表达的影响，为胃癌治疗的新药物研发和新靶点的确立提供参考。

    1 材料和方法

    1.1 主要试剂和仪器

    人胃癌细胞系SGC7901、MGC803 和正常胃黏膜GES-1、AGS 细胞系购自中国科学院上海细胞库。错义序列siRNA、miR-155-5p-模拟物和miR-155-5p-抑制剂由宝日医生物技术(北京)有限公司合成。RNA 分子序列如下：miR-155-5p 模拟物，5’-UUAAUGCUAAUCGUGAUAGGGGU-3’，miR-155-5p 抑制剂 ......