郭晨曦，史薇，冯旭曼，杨雅欣，龚法伍，刘占军

    华北理工大学 药学院，河北 唐山 063210

    在水溶液中，具有两亲性的分子可自组装成纳米粒，暴露出与周围水分子接触的亲水链，而将其疏水链隐藏在里面，为主药特别是疏水药物提供空间[1]。透明质酸能够主动靶向许多癌细胞过度表达的细胞表面受体CD44 受体，可作为构建纳米粒的亲水链[2]。熊果酸作为一种抗癌活性成分，可与姜黄素表现出协同抗肿瘤作用[3]，但较低的水溶性和生物利用度限制了其临床应用，需引入纳米技术制成纳米级制剂，以提高药物的临床疗效[4]。硫辛酸具有含二硫键的硫辛环结构，可发生硫醇/二硫醚的氧化还原反应[5]。在催化量1,4-二硫代苏糖醇的水性条件下，硫辛酸的硫辛环易开环，聚合形成线性聚硫化物[6]。谷胱甘肽在肿瘤细胞内的浓度为2～10 mmol/L，在细胞外的浓度为2～20 μmol/L，细胞外浓度明显高于细胞外，纳米粒中的硫–硫键结构断裂以响应肿瘤细胞内高浓度谷胱甘肽的细胞质环境[7]。熊果酸具有抗癌活性、强疏水性，所以将其作为疏水链，通过共价键接枝到具有肿瘤靶向性的透明质酸亲水骨架上，构建两亲性偶联物，同时在亲水骨架上接枝具有二硫键结构的交联剂硫辛酸，催化生成线性聚硫醚结构，进行交联，自组装后载姜黄素，构建具有氧化还原响应和肿瘤靶向性的纳米粒。基于以上，本实验对两亲性透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联物(hyaluronic acid-ursolic acidlipoic acid conjugate，LA-HU)自组装形成的纳米粒包载姜黄素的工艺进行研究，并对载姜黄素的透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联纳米粒(curcumin-loaded hyaluronic acid-ursolic acid-lipoic acid cross-linked nanoparticles，Cur/cLA-HU NPs)进行评价。

    1 仪器和试剂

    ZEN3690 型激光粒度分析仪(英国Malvern 仪器公司)；F-320 荧光分光光度计(天津港东科技股份有限公司)；Lambda 35 紫外可见光分光光度计(珀金埃尔默仪器有限公司)；Agilent 1260-API500高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)；iMark 全自动酶标仪(美国Bio-Rad 公司)；I70-S8F2 荧光倒置显微镜(日本Olympus 公司)；JEM-2800 场发射透射电子显微镜(日本电子株式会社)；实验透析袋MD44(相对分子质量3 500，北京怡康盛世生物科技有限公司)。

    姜黄素(质量分数98% ......