米娜瓦尔·哈帕尔，地力努尔·吐尔逊江，满尔哈巴·海如拉

    1.新疆医科大学第一附属医院 药学部，新疆 乌鲁木齐 830001

    2.新疆维吾尔自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐 830001

    青光眼是由多因素引起的一种进行性视神经病变，是仅次于白内障的第二大常见致盲疾病[1]。视神经萎缩、视野缺损、视网膜神经节细胞(RGCs)丢失是青光眼的主要病理特征，病理性眼压升高是青光眼发生、发展最重要的危险因素之一，病理性眼压升高引起的不可逆神经损伤也是青光眼致盲的主要原因[2-3]。因此，青光眼的临床治疗主要集中在使用药物或手术方法降低病理性眼压[4]，但由于慢性高眼压直接或间接诱导了RGCs 损伤，使得降低病理性眼压治疗并不能完全阻止青光眼神经变性的不可逆病程[5]。当前，探索预防和缓解RGCs 损伤的新靶点和新疗法，降低疾病进展已成为青光眼治疗研究的重要方向。加兰他敏是一种小分子乙酰胆碱酯酶抑制剂和烟碱受体激动剂，其与烟碱受体变构位点相互结合，可提高乙酰胆碱内在作用，同时能够增强大脑胆碱能系统活性，因此，加兰他敏在临床上被用于改善阿尔茨海默病患者的认知缺陷[6]。研究表明，加兰他敏具有神经保护作用，可改善神经毒剂诱导的神经胶质和生化变化[7]。Naguib 等[8]研究报道，加兰他敏在爆炸诱导的间接创伤性视神经病变小鼠模型中可减轻视神经轴突变性减少以及视觉功能缺陷。加兰他敏可能是视神经病变的潜在有效治疗药物。然而，加兰他敏是否在青光眼相关的慢性高眼压所致RGCs 损伤中发挥保护作用尚不清楚。因此，本研究以慢性高眼压大鼠模型为研究对象，探讨加兰他敏对慢性高眼压大鼠RGCs 损伤的影响作用及相关分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF 级SD 大鼠，雌雄各半，6～8 周龄，体质量(180±20)g，由新疆医科大学实验动物中心提供，动物许可证号SCXK(新)2018-0002。饲养条件为通风良好，室温20～25 ℃，相对湿度55%～75%，12 h/12 h 光暗循环，自由进食饮水。本实验经新疆医科大学第一附属医院动物伦理委员会批准后实施(审批号K202209-04)。

    1.2 试剂和仪器

    加兰他敏(质量分数≥98%，批号G125955-100 mg)购自上海阿拉丁生化科技公司；核因子E2 相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路抑制剂ML385(质量分数>99%，批号SML1833-25 MG)购自西格玛奥德里奇(上海)贸易公司；苏木精-伊红(HE)染色试剂盒、增强型化学发光(ECL)试剂(批号HZ2144、HZ0164)购自上海沪震实业有限公司；TUNEL 染色试剂盒(批号CA1040)购自北京杰辉博高生物技术有限公司；丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(批号 BLL100304E、BLL100322E、BLLX8426J)购自上海佰利莱生物科技有限公司；二喹啉甲酸(BCA)蛋白测定试剂盒(批号FT-P91144T)购自上海梵态生物科技有限公司；Nrf2、HO-1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)一抗(批号ab62352、ab305290、ab8245)以及辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔 IgG 二抗(批号ab150077)均购自艾博抗(上海)贸易有限公司 ......