香雪抗病毒口服液体外抗甲型流感病毒及炎症因子的作用机制研究
1材料,2方法,1细胞毒性实验,2体外抗病毒活性实验,3空斑减少实验,4免疫荧光法检测抗流感时相实验,5实时荧光定量PCR测定炎症细胞因子的表达,6蛋白印迹实验检测信号通路蛋白表达,7统计学方法,3结
李杰婷 ,陈俏连 ,赵昕 ,杨子峰,王玉涛*1.广州呼吸健康研究院,广东 广州 510000
2.广州医科大学附属第一医院 呼吸疾病国家重点实验室,广东 广州 510000
3.广东省化学测量与应急检测技术重点实验室,广东 广州 510000
4.广东省科学院测试分析研究所(中国广州分析测试中心),广东 广州 510000
流感病毒是具有包膜的单链负链核糖核酸(RNA)病毒,根据核衣壳蛋白(NP)和基质蛋白(MP)分为A、B、C、D(甲、乙、丙、丁)4 种类型[1-2]。其中甲型流感病毒(IAV)可引起人畜共患呼吸道传染病,对人类健康构成巨大威胁。据世界卫生组织估计,季节性流感每年可导致300~500 万人患上严重疾病,每年可致25~50 万人死亡[3]。预防和控制流感最有效方法是接种疫苗和抗病毒药物[4-5],但病毒变异和耐药性使流感难以控制[6]。因此,迫切需要寻找新的抗病毒药物。
在我国中药用于预防和治疗流感已有数千年的历史,在治疗流感具有多途径、多靶点、不良反应少且不易产生耐药的独特优势,而被临床广泛应用。抗病毒口服液作为经典中药制剂,临床用于流感、手足口病、上呼吸道感染、手足口病等疾病[7]。全方由9 味中药组成,方中板蓝根清热解毒、凉血消肿、利咽散结,连翘苦凉、清热解毒以祛邪,二者共为君药。生石膏、知母甘寒清润,消泻肺胃之热,能增强君药清热之力为臣药;广藿香芳香辛散、解表祛湿,芦根清热解暑、生津止渴,生地黄清热凉血生津,石菖蒲芳香走窜、化湿祛痰,郁金行气凉血利咽,共为佐药;共奏清热祛湿,凉血解毒之效[8]。现有药理应用和临床实验研究发现,抗病毒口服液在体内可通过抑制炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)从而达到减轻肺部炎症的作用,且可以提高γ 干扰素(IFN-γ)的含量从而抑制病毒的复制。此外,抗病毒口服液中的活性成分通过抑制线粒体融合素基因2(Mfn2)的表达以增强线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)抗病毒信号通路促进β 干扰素(IFN-β)的分泌,抑制流感病毒的复制,同时通过下调核因子-κB(NF-κB)抑制炎症反应,从而降低应激小鼠对流感病毒的易感性[9-15]。中药制剂由于现代工艺提取及遣方用药的配比不同,导致药效不同,而抗病毒口服液是基于原有的中药成分,进行了新的配比研发得来。本研究主要探讨了香雪抗病毒口服液体外抗流感病毒活性及其调节流感病毒诱导的炎症反应作用,以及在体外靶向宿主信号通路的潜在作用机制。
1 材料
香雪抗病毒口服液浸膏(规格0.352 g 生药/mL ......
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