柚皮苷通过减轻氧化应激降低急性肺损伤小鼠内皮通透性的研究
肺泡,1材料与方法,1实验动物,2药物及试剂,3仪器与设备,4动物分组及模型建立,5肺组织病理分析,6伊文思蓝成像及渗出率计算,7炎症指标检测,8氧化应激指标检测,9紧密连接蛋白和水通道蛋白表达检测,1
杨学敏,张欢欢,宋立强中国人民解放军空军军医大学第一附属医院 呼吸与危重症医学科,陕西 西安 710032
急性肺损伤是肺内外因素致肺泡上皮细胞及血管内皮细胞损伤造成的急性低氧性呼吸衰竭以及弥漫性肺水肿,严重时发展为急性呼吸窘迫综合征。病毒、细菌引发的肺炎,哮喘、急性期慢阻肺,或者休克、严重创伤等全身性疾病都有可能引发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征[1],如爆发的流感病毒[2]以及影响全球的新型冠状病毒肺炎[3],均有大量患者进展为急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征。急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征是一种发病率高、病死率高,但无特效药物的严重肺部疾病。
中医药在治疗急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征有丰富的临床经验以及理论基础。中草药和天然产物因具有抑制肺泡炎症反应、减轻氧化应激以及保护血管内皮等多重疗效在亚洲尤其是中国备受关注[4]。柚皮苷是存在于葡萄柚等多种橘类植物的天然黄酮类化合物。大量临床前研究表明,柚皮苷对肺部疾病具有镇咳[5]、祛痰[6]、抗炎[7]、抗肺纤维化[8]等药理作用,对其他疾病还能够抗氧化应激,保护血管内皮屏障[9]。
本研究通过建立脂多糖(LPS)滴鼻诱导急性肺损伤小鼠模型,并给予柚皮苷ig 治疗,明确柚皮苷对急性肺损伤小鼠血管内皮通透性及气道炎症的改善效果,拓展了柚皮苷防治急性肺损伤的药理作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物
8 周龄雄性C57BL/6 小鼠,体质量22~25 g,由浙江省实验动物中心提供,生产许可证号:SCXK(浙)2019-0002。小鼠饲养于空军军医大学实验动物中心清洁级屏障系统,恒温恒湿,所有饲养、实验操作均符合实验动物伦理学要求,使用许可证号:SYXK(陕)2019-001,实验伦理批准单位为空军军医大学实验动物中心福利与伦理委员会,伦理批号:IACUC-20230096。
1.2 药物及试剂
柚皮苷(货号10236-47-2,质量分数>98%,上海阿拉丁生化科技有限公司);醋酸地塞米松片(国药准字H12020686,规格0.75 mg/片,天津天药药业股份有限公司);LPS[货号L2880-100MG,西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司];白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)ELISA试剂盒(货号70-EK201B、70-EK206、70-EK282,杭州联科生物技术股份有限公司);BCA 蛋白含量检测试剂盒(货号KGP902,南京凯基生物科技发展有限公司);微量丙二醛(MDA)测定试剂盒(TBA法)、总超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(WST-1 法)(货号A003-2-2、A001-3-2 ......
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