HPLC 多指标成分定量联合化学计量学评价不同产地茜草
脂素,谷甾醇,1材料,1试药,2仪器,2方法与结果,1对照品溶液的制备,2供试品溶液的制备,3色谱条件,4方法学考察,5样品测定,6主成分分析(PCA),7正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),8
姜云,乔春凤,刘华,乔亚红,李俊涛1.郑州颐和医院 药学部,河南 郑州 450047
2.河南省医药科学研究院 药物研究所,河南 郑州 450052
茜草是茜草科植物茜草Rubia cordifoliaL.的干燥全草,可凉血、祛瘀、止血、通经,临床上主要用于吐血、衄血、崩漏、外伤出血、瘀阻经闭、关节痹痛、跌扑肿痛[1]。蒽醌及其苷类化合物、萘醌类、萘氢醌、黄酮类、环己肽类、多糖类和微量元素等是茜草中主要药效成分[2-4]。现代研究表明,茜草具有抗肿瘤、升高白细胞、免疫调节、护肝、抗炎、抗风湿、抗氧化、止血等作用[5-7],并且现代研究还证明,蒽醌类成分茜草素在体外对沙门菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和变形杆菌等都具有明显的抑制作用[4],还用于治疗婴幼儿病毒性腹泻[5,8]。茜草收载于《中国药典》2020 年版一部,标准中规定大叶茜草素不得少于0.40%,羟基茜草素不得少于0.10%。对于茜草质量研究文献仅限指纹图谱[9-12]和1~2 个成分的定量[13-15]。中药是复杂的个体,所含成分多而杂,少数指标成分不能诠释其内在整体质量。主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)是化学计量学常用的技术手段,通过对含量数据分析挖掘,查找共性和不同,对样品分组分类,发现决定产品质量的标志性成分,预测精度高[16-19]。灰色关联度分析(GRA)可客观地对各组数据相似程度进行因素间相互关联分析,是解决多目标之间复杂关系问题的有力工具[20-22]。PCA、OPLS-DA 和GRA 均不存在主观因素,客观地对大量数据进行分析,非常适用于所含成分繁多的中药。本研究收集陕西、河南、安徽、河北、山东、青海、四川和西藏8 省区共18个批茜草药材,采用HPLC 法同时测定新橙皮苷、山柰酚、茜草素、异茜草素、羟基茜草素、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌、大叶茜草素、去氢-α-拉杷醌、β-谷甾醇、异落叶松脂素10 种成分,通过化学计量学结合GRA 法进行综合质量评价,希望为茜草质量总体评价和新标准的提升、制定提供数据。
1 材料
1.1 试药
新橙皮苷(批号111857-202305,质量分数99.6%)、山柰酚(批号110861-202214,质量分数97.4%)、羟基茜草素(批号111898-202004,质量分数98.8%)、大叶茜草素(批号110884-202107,质量分数99.5%)、β-谷甾醇(批号110851-201909,质量分数92.7%)对照品均购自中国食品药品检定研究院;茜草素(批号CFS202301 ......
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