袁东杰，李艳峰，卢振民

    新乡医学院第一附属医院 耳鼻咽喉科，河南 新乡 453100

    鼻咽癌是临床上常见的头颈部恶行肿瘤，发病率为耳鼻咽喉恶性肿瘤之首，具很强的地域分布性，常发于我国南方地区[1]。目前，临床上关于鼻咽癌患者治疗主要通过同步放化疗方式，但是长期的放化疗容易造成患者复发和病灶转移[2]。因此，积极探寻鼻咽癌的发病机制及相关治疗靶点是目前迫切需要的。细胞自噬在肿瘤的发生发展、浸润转移及耐药性中发挥双重调控作用，被认为是肿瘤治疗潜在的重要机制[3]。多项研究证实，细胞自噬参与了鼻咽癌细胞的增殖、凋亡及转移[4-5]。激活细胞自噬能够抑制鼻咽癌细胞增殖，诱导细胞凋亡[6]。但也有部分研究证实，自噬对鼻咽癌细胞的增殖和生长具有显著的促进作用，通过激活细胞自噬能够抑制细胞凋亡，促进细胞增殖，提高鼻咽癌细胞的存活[7-8]。以上研究表明自噬在鼻咽癌中可能发挥“双刃剑”作用。因此，以细胞自噬为靶点的研究将对鼻咽癌新药的开发具有重大意义。

    牡荆素是一种天然的生物活性黄酮类化合物，具有抗炎、抗氧化以及抗肿瘤等多种生物学活性，且对疾病的治疗效果较为显著，不良反应小、安全性较高等优势，被认为是一种极具开发潜力的活性天然化合物[9-10]。研究显示，牡荆素能够发挥抗结直肠癌[11]、肺癌[12]、肝癌[13]等作用。Wang 等[14]研究证实，牡荆素能够通过调控核因子-κB(NF-κB)通路诱导鼻咽癌细胞凋亡，抑制细胞生长，表明牡荆素可能是未来鼻咽癌潜在的治疗药物。腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/UNC-51 样激酶1(ULK1)是介导细胞自噬形成的重要信号通路，参与鼻咽癌细胞自噬调节，进而抑制细胞增殖，促进细胞凋亡发生[15]。Zhang 等[16]研究证实，牡荆素能过够通过激活AMPK 信号通路介导的细胞自噬，改善氧化低密度脂蛋白介导的内皮损伤。此外，牡荆素能够通过激活AMPK/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路诱导细胞自噬水平升高，促进细胞凋亡，从而抑制肾细胞癌生长[17]。以上研究提示牡荆素很有可能通过调控AMPK/ULK1 介导的细胞自噬途径抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤生长。为此，本研究拟通过对BALB/c 裸鼠左侧前肢腋窝下接种CNE-2 细胞构建鼻咽癌裸鼠成瘤模型，探究牡荆素对其移植瘤生长及AMPK/ULK1 介导的细胞自噬通路的影响，旨在阐明牡荆素抗鼻咽癌生长的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞和动物 人鼻咽癌细胞CNE-2 购自中国科学院上海细胞库；50 只SPF 级的BALB/c 裸鼠 ......