赵晨颖 ，韩雪 ，贺一凡 ，史海龙，王斌，卫昊，史永恒*，刘继平

    1.陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046

    2.陕西省中医药管理局 中药药效机制与物质基础重点研究室，陕西 咸阳 712046

    糖尿病是以机体对糖利用效率降低引起的血糖过高为主要特征的代谢性疾病，进而引起蛋白质和脂肪代谢异常，后期会逐渐导致眼、心、脑、肾、足等多器官急慢性并发症。2015—2017 年我国18岁及以上人群糖尿患病率为11.2%，达1.56 亿人[1]。因此，寻找治疗糖尿病的药物是药物研究的热点。

    荭草素和异荭草素是一类黄酮碳苷类化合物，为蓼科植物荭蓼PolygonumorientaleL.的主要活性成分，在西番莲、决明、黄荆、竹叶、满天星、麻花艽等中药材中也存在。近年来的药理学研究表明，荭草具有丰富的药理活性，其主要活性成分荭草素和异荭草素具有心血管保护、抗衰老、抗肿瘤、抗炎、调血糖等药理作用[2-4]。荭草素和异荭草素可以改善脂肪细胞中的葡萄糖代谢，维持肝细胞的底物利用率来改善胰岛素抵抗现象已被证实[5]，但关于其降血糖的靶点及体外活性研究较少。

    本研究拟通过虚拟分子对接筛选中药荭草中黄酮碳苷类有效成分荭草素和异荭草素可能的降血糖靶点，并对关键靶点进行体外活性测试，从而揭示荭草素和异荭草素降血糖作用及其作用机制。

    1 材料

    1.1 药品及主要试剂

    荭草素(成都曼思特化学制剂有限公司，质量分数≥98%，批号20171105)；异荭草素(成都曼思特化学制剂有限公司，质量分数≥98%，批号20171105)；荧光脱氧葡萄糖(1-NBDG，药明康德新药开发有限公司，批号ET4099-7-P1)；达格列净(上海瀚香生物科技有限公司，批号2014102202)；4-硝基苯基-α-D-葡萄糖苷(PNPG，成都华娜化学制剂有限公司，批号20171026)；阿卡波糖(成都艾娜华化学制剂有限公司，批号20170828)；DMEM培养基(武汉赛维尔生物科技有限公司，批号GP21110161645)；胰蛋白酶(武汉赛维尔生物科技有限公司，批号CR2112015)；磷酸缓冲液(武汉普诺赛生命科技有限公司，批号WH0022A071)；氯化胆碱、氯化钾、氯化镁、氯化钙(天津市天力化学试剂有限公司)。

    1.2 细胞

    稳定过表达钠–葡萄糖协同转运蛋白 2(SGLT2)的HEK293(人胚胎肾上皮细胞)，稳定高表达蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的293T 细胞(人胚肾细胞) ......