王珏

    宿迁市第一人民医院 药学部，江苏 宿迁 223800

    宫颈癌是一种始发于宫颈细胞的癌症，但其通常会随着时间的推移而缓慢发展[1]。发育异常的子宫颈细胞首先出现在子宫颈组织中，随着时间的推移，如果不进行干预或清除，异常细胞可能会变成癌细胞，并开始生长和扩散到更深的子宫颈和周围组织[2]。在目前的研究表明，宫颈癌多由高风险类型的人类乳头瘤病毒(HPV)诱发，其中HPV16、HPV18 占到了70%[3]。定期接受宫颈癌筛查和接种HPV 疫苗被认为是预防宫颈癌发生的有效手段[4]，但目前这2 种手段在我国的普及率较低[5]。目前治疗宫颈癌的常规手段为手术治疗、化疗、放射疗法及靶向治疗[6-7]。千层纸素A 是一种从黄芩根皮中所提取的活性成分，多项研究表明千层纸素A 具有抗肿瘤、抗炎、神经调节等多种药理作用[8-10]。

    SHC SH2 结构域结合蛋白1(SHCBP1)是细胞表面受体的重要蛋白[11]，它将激活的生长因子受体偶联到表皮生长因子受体(EGFR)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)和胰岛素受体等相关信号通路[12]。SHCBP1 在多种癌症中如肝癌、乳腺癌、胶质瘤中过表达，目前有研究表明SHCBP1 的表达还与肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)和免疫抑制基因(TGFBR1、PD-L1、TGFB1 等)呈正相关[13-15]，表明SHCBP1 与肿瘤免疫有着密切的关系。

    目前对于千层纸素A 抗肿瘤作用研究得到了重点关注，但其作用的机制仍有待研究。本研究通过MTT 比色法证实了千层纸素A 可以抑制宫颈癌细胞的增殖，并基于前期研究的基础，通过Western blotting 实验分析千层纸素A 与SHCBP1 之间的关系。此外，对千层纸素A 与SHCBP1 进行计算机模拟分子对接，分析结合效能。

    1 实验材料与方法

    1.1 实验材料

    HeLa 细胞购自上海中乔新舟生物科技有限公司；千层纸素A(质量分数≥98%，货号480-11-5)购自成都普思生物科技股份有限公司；SHCBP1 抗体(货号12672-1-AP)购自美国Proteintech 公司；DMSO(货号ST038)、MTT 毒性检测试剂盒(货号C00098)、PBS(货号C0221A)购自上海碧云天生物技术股份有限公司；DMEM 培养基(货号6122692)购自美国Gibco 公司；胎牛血清(货号11011-8611)购自浙江天杭生物科技股份有限公司。

    超精密天平(瑞士梅特勒-托利多公司)、多功能微孔板检测仪(美国伯腾仪器有限公司)、双红外激光色成像仪(美国LI-COR 公司)；电泳仪(美国BIO-BAD 公司) ......