胡小东， 关 浩， 杨立山

    (1.宁夏医科大学，银川 750004； 2.宁夏医科大学总医院急诊科，银川 750004)

    急性CO中毒迟发性脑病(delayed encephalopathy after acute carbon monoxide poisoning，DEACMP)是急性CO 中毒最严重的神经系统并发症，约3%～30%的严重CO 中毒患者经过2～60 d 的假愈期后出现迟发性脑病[1]，其确切发病机制迄今尚未阐明，无特效的治疗手段，给社会和家庭带来沉重的负担。筛选合格DEACMP 模型是验证造模成功与否的基础，是探索其发病机制的前提，对预判DEACMP 易发时间段提供一定的依据，对指导下一步治疗有重要应用价值。本实验采用连续腹腔注射CO 染毒的方式造模，在造模前后6 个时间筛选点，先通过Morris 水迷宫定位航行实验的平均潜伏期检测DEACMP 大鼠认知功能，初步筛选出DEACMP 大鼠模型，再通过组织形态学技术观察海马神经元变性坏死情况，将变性坏死的神经元计为“阳性细胞”，对平均潜伏期和阳性细胞进行相关性分析，探索Morris 水迷宫在连续筛选DEACMP 模型方面的应用价值。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组

    选择健康成年雄性SD 大鼠，体质量在280～330 g，实验动物由宁夏医科大学实验动物中心提供[SCXK(宁)2015-0001]。SD 大鼠先经过Morris 水迷宫定位航行实验训练5 d，第6 天筛选出60 s 以内能找到平台的合格SD 大鼠108 只，编号后按随机数字表法，随机分为：DEACMP 组，给予CO 纯品气体腹腔注射[2]；空气组，给予空气腹腔注射；空白组，不进行任何预处理。每组36 只大鼠。根据造模前后6 个时间筛选点(造模前、造模后第1 天、第7 天、第14 天、第21 天、第28 天)，将DEACMP组、空气组、空白组分别分成6 个亚组，每个亚组6 只，造模过程中死亡的大鼠继续训练补充。

    1.2 实验试剂及仪器

    CO 纯品气体(99.99%)购自佛山市科的气体化工有限公司；血气分析仪(Cobasb221)购自Roche公司；Morris 水迷宫分析跟踪系统购自成都泰盟公司；石蜡切片机(Leica Rm2235)购自Leica 公司。

    1.3 大鼠模型制备

    DEACMP 组采用改良式腹腔注射CO 法建立DEACMP 大鼠模型[3](首次注射99.99% CO 纯品气体120 mL·kg-1 ......