刘伯霞， 申 琴， 焦海燕， 李 涛， 陈 静

    (1.宁夏医科大学基础医学院，银川 750004； 2.宁夏回族自治区生育力保持教育部重点实验室，银川 750004；3.宁夏医科大学总医院肿瘤外科，银川 750004)

    胃癌是一种严重威胁人类生命的致死性疾病，全球每年约723000 人死于胃癌[1]。由于胃癌早期一般没有明显症状，胃癌被确诊时通常已是晚期，并伴有肝、肺、腹膜和淋巴结的转移。一旦形成远处转移灶，患者5 年生存率下降到10%以下，中位生存期为9～10 个月[2]。目前，手术、放疗以及化疗是治疗胃癌的主要手段，但由于晚期胃癌患者术后会出现肿瘤转移和复发，提高患者总体生存率仍然是一个巨大的挑战[1]。因此，开发有效抗肿瘤转移的药物显得尤为迫切。有研究证实[3]，源于中草药的单体和提取物不仅毒性小，且具有显著的抗肿瘤效果，已成为目前抗癌药物研究的热点。2017 年欧洲科学家调查发现，柑橘属水果，对消化系统和上呼吸道癌症有很好的预防作用[4]。随着柑橘综合利用的深入，各种有效成分逐步被提取和分离出来，尤其以存在于桔皮及柚皮中柠檬苦素(limonin)在预防和控制肿瘤方面显示良好的效果[5]。因其药理作用强，毒性低，不良反应轻而受到越来越多学者的重视与青睐，但其对于胃癌细胞转移的抑制作用及相关信号通路和靶点的研究，国内外鲜见报道。信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)作为一种已知与癌细胞增殖和转移相关的致癌转录因子，磷酸化后与STAT 家族的其他成员形成同源二聚体或异二聚体。随后，活化的STAT3 复合物易位到细胞核中，启动STAT3 靶基因的转录，其中就包括基质金属蛋白酶9(MMP-9)[6]，而MMP-9 的表达与胃癌的恶性程度呈正相关[7]，提示MMP-9 是胃癌转移过程中的一个重要因素。因此，本研究旨在初步探讨柠檬苦素抑制胃癌细胞体内外转移的作用以及与STAT3/MMP-9 信号通路的相关性，以便为阐明柠檬苦素的抗癌新功能和抗肿瘤新机制以及研发具有我国自主知识产权的肿瘤生物治疗药物提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要仪器设备 二氧化碳培养箱(力康生物医疗科技控股有限公司)，倒置荧光显微镜(OLYMPUS 公司)，PCR 仪(Bio-Rad 公司)，SDSPAGE 电泳设备(Bio-Rad 公司)，低温离心机(4 ℃)(Eppendorf 公司) ......