严 姣， 李亚妮， 郝乐乐， 宋 辉， 刘贺荣， 陈 楠

    (宁夏医科大学公共卫生与管理学院，银川 750004)

    甲醇是一种有毒的酒精气味液体。目前已经被大规模生产并使用，且甲醇职业人群也相应增加，这就为我国的职业卫生工作提出了新的挑战。甲醇主要经消化道、呼吸道、皮肤进入机体后可致眼毒性、代谢性酸中毒、神经毒性[1]。目前，国内外对于甲醇的毒性多集中于眼部损害及代谢性酸中毒，对中枢神经系统作用主要集中在影像学方面[2]，而甲醇中枢神经毒性研究较少。本课题组前期发现[3]甲醇对大鼠染毒后对大鼠大脑产生氧化应激作用并可激活线粒体细胞凋亡途径引起神经细胞凋亡。甲醇可以致机体产生氧化应激[4]，另有研究报道[5]甲醇可以诱导线粒体DNA 损伤。因此本课题研究以甲醇为受试物，对人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)进行染毒后，用流式细胞仪、单细胞琼脂糖凝胶电泳检测细胞氧化应激水平、DNA 损伤情况，探讨SK-N-SH 细胞氧化应激与DNA 损伤情况及二者的关系，为甲醇的神经毒性研究提供进一步的科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂与仪器

    甲醇(天津瑞金特化学品有限公司，中国)，胎牛血清(Biological Industries，以色列)，MEM 培养基(上海中桥新舟，中国)，活性氧(ROS)检测试剂盒(碧云天，中国)，荧光显微镜(Olympus，日本)，流式细胞仪(Sysmex，日本)，电泳仪(Tanon，中国)。

    1.2 细胞培养与染毒

    本课题组前期通过CCK-8 法检测SK-NSH 细胞增殖活力[6]，分别用0、250、500、750、1000、1250、1500、1750、2000 mmol·L-1浓度的甲醇染毒24、48 h，染毒48 h 后拟合的线性回归方程为Y=1.10767-0.00047X ......