霍 泉， 孙东君， 李 婷， 孙 婷， 杜 勇

    (1.宁夏医科大学，银川 750004； 2.宁夏医科大学总医院生物样本库，银川 750004； 3.宁夏医科大学总医院小儿外科，银川 750004)

    秀丽隐杆线虫肌肉表达物3(Mex3c)是从线虫到人类的保守RNA 结合蛋白，是一种含有hnRNPK 同源的(KH)RNA 结合结构域的 RNA 结合蛋白[1]，其含有E3 泛素连接酶，参与调控pal-1，rme-2 和 nos-2 等靶 RNA，相关研究报道[2-5]，Mex3c 基因可导致遗传易感的高血压病、控制恶性肿瘤中RNA 的不稳定性、通过促进能量消耗，减少机体脂肪的堆积。课题组前期研究[6]发现，Mex3c 在突变的小鼠体内表现出强烈的负能量平衡作用。C-FOS 蛋白(原癌基因表达产物)作为神经系统的转录因子，可通过广泛的跨突触信号转导、转录刺激快速诱导，在生理、环境、药理学和其他应激刺激下成为急性神经元激活的有力和有效的标志[7-8]，正常生理条件下，在中枢神经系统中只有基础水平的表达，参与细胞的生长、信息传递的功能，在能量平衡的研究中，瘦素等多种参与能量平衡调控的信号也是通过诱导突触后C-FOS 表达进行信号转导的[9-10]。为了深入研究Mex3c 和C-FOS 在神经细胞信号转导中的关系，本研究采用Mex3c 基因敲除小鼠，通过给小鼠注射瘦素(引起负能量平衡效应)和饥饿激素(引起正能量平衡效应)，诱导参与能量平衡的信号通路的神经元表达C-FOS，通过检测CFOS 在这些刺激下的表达情况，为Mex3c 调控能量平衡的机制提供解剖学依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物和试剂

    正常和Mex3c-/+FVB 的8 周龄小鼠各15 只购自赛业生物有限公司、尼氏染色试剂盒购自凯基生物有限公司、C-FOS 小鼠抗小鼠IgG1 抗体、瘦素(Leptin)购自Proteintech 公司、小鼠二步法检测试剂盒PV-9002、DAB 显色液购自中杉金桥公司、饥饿激素(Ghrelin)购自Tocris 公司。

    1.2 方法

    1.2.1 实验动物及分组 正常和Mex3c-/+FVB的8 周龄小鼠各15 只 ......