彭根远， 周 洁， 陈 托， 李 海， 巩发海， 孙书豪

    (1.宁夏医科大学，银川 750004； 2.宁夏医科大学总医院结直肠外科，银川 750004)

    结直肠癌是常见癌症之一，全球每年死亡例数超过693900 例[1]。是中国排名第四位的恶性肿瘤，且发病率有逐年上升趋势[2]。自20 世纪90 年代人们发现基质金属蛋白酶类(MMPs)能促进肿瘤组织的血管生成，促使肿瘤组织的生长和转移，激发了研究者们对MMPs 研究的兴趣[3-4]。研究发现结直肠癌症患者血清表达MMP-10 者常预后不良[5]，有学者研究消化道肿瘤发现MMP-10能够通过调控钙离子通道促进消化道肿瘤的发展[6]，肿瘤细胞通过分泌各种酶类降解细胞外基质，向周围及远处组织侵袭转移，促进肿瘤微血管生成，其中最重要的是基质金属蛋白酶类[7]。推测MMP-10 可能参与了结直肠癌的进展和转移。本实验通过Western blot 和实时荧光定量PCR(qPCR)及免疫组织化学染色方法检测结直肠癌、癌旁以及正常结直肠组织中MMP-10 蛋白及mRNA 的表达情况，并研究其与患者临床病理特征的关系，分析MMP-10 在结直肠癌中的可能作用及临床意义。

    1 材料和方法

    1.1 临床资料

    标本组织源于 2018 年3—12 月宁夏医科大学总医院结直肠外科手术获取的结肠癌或直肠癌组织40 例和相对应的癌旁组织(距离癌组织中心≥4 cm)以及相对正常的结肠或直肠组织(距离癌组织中心≥8 cm 或大肠癌标本切口缘最远端)标本；所有患者术后均由宁夏医科大学总医院病理科确诊为结直肠癌。所有患者术前均未进行放疗、化疗，年龄 43～83 岁，平均(61.37±11.45)岁；男 22 例、女 18 例；直肠癌 26 例、结肠癌 14 例。

    1.2 主要试剂和仪器

    全蛋白提取试剂盒(凯基生物)、5×SDSPAGE 蛋白上样缓冲液(凯基生物)、BCA 蛋白含量测试试剂盒(凯基生物)、彩色蛋白Marker(凯基生物)、PVDF 膜(ImmobilonRTransfer Membranes)；Trizol(Invitrogen 公司)、反转录 cDNA试剂盒(Thermo Fisher ......