牛永莉， 贾晓波， 王 艳

    (1.甘肃酒泉市人民医院医学辅助生殖专科，酒泉 735000； 2.甘肃酒泉市人民医院妇产科，酒泉 735000)

    宫颈癌是最常见的五大妇科肿瘤之一，每年全世界宫颈癌的发病人数约为50 万[1]。研究[2]发现，人类乳头瘤病毒(HPV)感染是导致宫颈癌的重要原因，基因变化导致基因组的不稳定则是宫颈癌发生的重要机制。有研究[3]表明，宫颈癌细胞染色体变化是非随机的，而宫颈癌细胞染色体频繁杂合性缺失，抑癌基因可能与宫颈癌的发生发展密切相关。肿瘤的转移主要包括细胞迁移、侵袭、黏附以及细胞外基质(ECM)蛋白的降解，且与 MMP-2 和 MMP-9 高表达相关[4-5]。此外，宫颈癌上皮内瘤病变(CIN)程度增加，MMP-2 表达也逐渐增加，这一现象表明MMP-2 过度表达可能引起潜在的肿瘤入侵和转移[6]。髓样锌指1(MZF1)基因是C2H2型锌指转录因子Kruppe 家族的一员[7]，MZF1 参与造血和非造血细胞的分化、迁移和增殖[8]，抑制MZF1 表达则能够抑制人肝细胞癌增殖、迁移和入侵[9]。然而，在高侵袭性的宫颈癌细胞中，MZF1 是如何调节MMP-2 表达的分子机制尚不是十分清楚。我们将考察MZF1 抑制人类宫颈癌细胞的迁移和侵袭的作用机制，并探究MZF1 如何影响MMP-2 表达。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 细胞系、质粒 人子宫颈鳞癌细胞SiHa购于美国ATCC 细胞库，本课题组前期已成功构建过表达质粒(pcDNA-MZF1)，并通过测序验证。

    1.1.2 试剂 MZF1 抗体、MMP-2 抗体、MMP-9抗体以及β-actin 抗体(美国Santa Cruz 公司)；Jet-PEI 转染试剂(法国 PolyPlus 公司)；辣根过氧化物酶标记羊抗兔抗体(北京中杉金桥生物技术有限公司)；RT-PCR 试剂盒(大连宝生物工程有限公司)；实验所需引物由宝生物工程(大连)有限公司设计并合成，实验所用其他试剂购于上海碧云天生物技术有限公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养和稳定转染 将人子宫颈鳞癌细胞SiHa 细胞置于含10%胎牛血清(FBS)、100 U·mL-1青霉素、100 μg·mL-1链霉素的细胞培养基(DMEM)中 ......